摘要
牡丹（Paeonia suffruticosa Andr.）为毛茛科芍药属多年生木本植物，以其干燥根皮入药，牡丹皮是我国传统中药材，临床应用广泛。牡丹皮始载于《神农本草经》，具有清热凉血、活血化瘀之功效，主要用于热入营血、温毒发斑、吐血衄血、夜热早凉、无汗骨蒸、经闭痛经、跌扑伤痛、痈肿疮毒等。药用牡丹种子不耐盐碱，种子市场混乱，存在发芽率低、发芽缓慢、发芽率参差不齐等问题。本研究探索了药用牡丹种子质量检验方法，建立了药用牡丹种子质量分级标准，并将纳米TiO2引发技术应用到药用植物种子引发中，研究了盐逆境下的种子引发技术。取得的主要研究结果如下: 1.参考国际植物种子检验规程和农作物种子检验规程的方法，测定了不同产地药用牡丹种子质量，初步建立了药用牡丹种子质量检验方法:药用牡丹种子净度分析送检样本最少7000g，试验样本最少700g;真实性鉴定采用种子外观形态比较;千粒重测定采用百粒法;含水量测定采用低恒温烘干法10h;室温清水浸泡24h，黑暗条件下昼夜变温层积(20℃12h和25℃12h)60d后，用300mg·L-1GA3浸泡种子24h，以砂中作为发芽床，在15℃光照条件下萌发，发芽首末次计数时间为12～60d;生活力测定采用TTC染色法。 2.对收集的31份不同产地药用牡丹种子进行净度、千粒重、含水量、生活力、生根率及发芽率等指标的测定，通过SPSS分析软件对以上数据进行聚类分析。以生根率、发芽率及净度作为主要参考指标，生活力、千粒重、含水量作为重要参考指标，并结合实际生产，将药用牡丹种子分为三个等级:生根率≥80％，发芽率≥80％，净度≥90％,生活力≥80％，千粒重≥250g，含水量≤10％定为一级;生根率≥50％，发芽率≥60％，净度≥70％，生活力≥75％，千粒重≥225g，含水量≤10％定为二级;生根率≥20％，发芽率≥45％，净度≥60％,生活力≥45％，千粒重≥205g，含水量≤10％定为三级。 3.以未引发种子及水引发种子为对照，研究了3种引发时间及5种纳米TiO2浓度对药用牡丹种子萌发、幼苗生物量、幼苗光合特性的影响。结果表明:引发时间为48h，低浓度的纳米TiO2(2～500mg·L-1)显著促进药用牡丹种子萌发及幼苗生物量，种子生根率、发芽率、幼苗株高、侧根数及幼苗地上部干鲜重显著高于对照及水引发;纳米TiO2浓度为2mg·L-1，引发时间48、72h幼苗叶片净光合速率和叶绿素含量分别达到最高，而其他浓度对光合作用影响不显著。 4.以未引发及水引发种子为对照，研究了低盐胁迫下纳米TiO2引发处理对药用牡丹种子萌发、幼苗生物量、侧根数、抗氧化物酶活性(POD、SOD、CAT)、可溶性蛋白含量、净光合速率及相对叶绿素含量的影响。结果表明:低盐(0.3％)胁迫下，药用牡丹种子发芽受到显著的抑制作用，经过低浓度(2～100mg·L-1)纳米TiO2引发处理48h后，药用牡丹种子发芽率、幼苗生物量、侧根数、抗氧化酶活性、叶绿素含量均显著提高;经过纳米TiO2(2～1000mg·L-1)引发处理72h后，药用牡丹幼苗净光合速率显著提高。
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