摘要
枣（Ziziphus jujuba Mill.）是中国独具特色的重要经济林树种，种质资源丰富。‘马牙枣’（Ziziphus jujuba Mill.Maya zao）是优良鲜食早熟品种，果皮薄，营养丰富，经济价值较高，深受消费者喜爱。前期研究中，本课题组采用秋水仙素田间诱导‘马牙枣’产生2n雌配子，自由授粉后获得了三倍体新种质。本研究以该三倍体种质为材料，进行父本分析，并在此基础上，通过对比观测该种质与其全同胞二倍体及其母本的性状，掌握该种质的生长特征变异情况。同时，建立‘马牙枣’和三倍体新种质的组织培养和离体再生的体系，进一步对三倍体种质叶片离体再生不定芽的过程进行形态学和组织学观察。主要试验结果如下： （1）通过父本分析，鉴定出三倍体新种质的真实父本为酸枣（Ziziphus jujuba Mill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chow），同时鉴定出四株全同胞二倍体；根据亲本和三倍体相同位点分子标记分布情况，证实该三倍体为雌配子染色体加倍所得。三倍体新种质的针刺更发达、叶面积更大但叶形指数较低，叶片呈现卵圆形，叶缘呈现锯齿状，表现出与二倍体明显的区别；三倍体气孔长度和宽度显著高于二倍体，而密度更小。对叶片解剖结构观测发现，三倍体叶片较厚且结构更为紧密、细胞层数没有明显变化但体积显著增大，且细胞生长良好未出现损伤。三倍体植株还表现出更为优良的光合和生理性状。 （2）‘马牙枣’和三倍体种质最佳启动外植体为带腋芽茎段；最佳启动培养基均为MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.9g/L，萌发腋芽生长良好；三倍体种质组培苗最佳增殖培养基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+TDZ0.001mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.9g/L，增殖系数可达2.7，分生苗茎粗壮、叶片深绿、生长旺盛；三倍体种质的最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.6mg/L+NAA0.4mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.9g/L，生根率、平均根数和平均根长分别为88.24%、5.47根和0.52cm。（3）‘马牙枣’半木质化带腋芽茎段的再生效果最好；筛选出最佳诱导培养基为MS+6-BA1.5mg/L+IBA0.2mg/L+TDZ0.01mg/L，茎段出愈率可达100%，平均每外植体出芽数可达3.12个，芽和愈伤组织生长良好；三倍体新种质叶片不定芽再生最佳诱导培养基为WPM+TDZ1.0mg/L+IBA0.3mg/L+蔗糖30g/L+琼脂5.9g/L，不定芽诱导率达92.87%，每片叶不定芽再生数可达3.6个；通过对三倍体种质叶片不定芽再生过程的形态学和组织学观察发现，该过程属于直接再生途径获得不定芽；再生不定芽主要起源于叶脉维管束周围的薄壁细胞。
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