摘要
目的：研究在细胞体外环境中，甲基化抑制剂地西他滨联合多巴胺激动剂卡麦角林治疗DARPs能否逆转其对多巴胺激动剂敏感性，并检测DNA甲基化调控在耐药性泌乳素细胞腺瘤细胞中的差异表达基因。方法：对大鼠垂体瘤GH3细胞系使用DAC干预，并分别分组进行miRNA及mRNA高通量测序，通过对比得出差异表达基因，验证并使用生信分析方法确认与D2R相关的差异表达基因。结果：使用RNA-seq和miRNA-seq数据构建了miRNA-mRNA调控网路，并且最终比对出了6组靶标基因（miR-370-3p，Fosl1；miR-326-3p，Nrbp2；4_30490，Vash1；17_19809，Ikzf3；15_16363，Tpm2；12_11129，Trim7），分别使用文库样本验证上述6个miRNA和6个mRNA的表达量，结果表明在与对照组相比Tpm2、Nrbp2、Trim7、Vash1基因在实验组中表达量升高，Fosl1、Ikzf3基因在实验组中表达量降低，且Two-wayANOVA有显著性差异，并将6种基因（Tpm2、Nrbp2、Trim7、Vash1、Fosl1、Ikzf3）提取核酸序列与D2DR（human/mRat）基因样本库做比对，得出结果证实Fosl1基因与D2DR有直接关联。随后对裸鼠进行皮下种植瘤模型实验，分DAC+CAB组及CAB对照组进行实验，提取蛋白进行Western-blot，结果提示DAC+CAB组D2R表达增高，提示DAC对提高DAs敏感性有效。结论：证实Fosl1基因（对应miR-370-3p）在泌乳素瘤的地西他滨干预下呈现出差异表达，并且其与D2R的表达有直接关联，且证明了地西他滨对改善多巴胺受体激动剂DAs类药物敏感性有一定作用，在今后的耐药型泌乳素腺瘤的研究中提供一种新的思路。
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