摘要
[目的]双膦酸盐性颌骨坏死(Bisphosphonate-relatedofosteonecrosisofthejaw,BRONJ)是长期应用双膦酸盐类药物用于治疗恶性肿瘤（乳腺癌，前列腺癌及肺癌等）骨转移及骨质疏松等出现在颌面部表现为颌骨感染、坏死的特异性疾病，然而关于BRONJ的发病机制，目前尚不清楚。越来越多的研究表明BRONJ的发生与免疫功能抑制有密切关系。本研究通过建立BRONJ小鼠模型，检测了模型小鼠外周血MDSCs及亚群和单核细胞的所占比例的变化，探究了BRONJ的发生发展与MDSC变化的关系，揭示了双膦酸盐通过对机体免疫功能的影响促进BRONJ的发生，进一步探究BRONJ的发生机制。 [材料与方法]通过C57BL/6小鼠尾静脉注射唑来膦酸及拔除小鼠右上颌第一磨牙，建立小鼠BRONJ模型，比较拔牙+生理盐水与拔牙+双膦酸盐小鼠牙槽骨创伤区牙龈愈合情况、Micro-CT测量拔牙后牙槽窝骨质修复情况、组织学检测拔牙窝周围骨质破坏及坏死情况，判断BRONJ小鼠模型是否成功。利用流式细胞术检测正常对照组（5只）、拔牙+生理盐水对照组（5只）、拔牙+唑来膦酸组（5只）与拔牙+唑来膦酸+地塞米松组（5只）外周血MDSC(CD11b+Gr1+)及亚群M-MDSC(CD11b+Ly6G-Ly6C+)、PMN-MDSC(CD11b+Ly6G+Ly6C-)、单核细胞(CD11b+Ly6C+)的变化情况，及MDSC中具有趋化功能CCR2+，和具有抗原提呈功能的MHC-Ⅱ+细胞所占的比例变化，分析模型小鼠中MDSC及亚群的比例、单核细胞比例，以及CCR2+、MHC-Ⅱ+MDSC的比例变化与BRONJ发生的关系。 [结果]1、模型建立:拔牙+生理盐水组拔牙窝已经完全愈合，拔牙窝表面牙龈黏膜完整，无明显增生、肿胀。拔牙+唑来膦酸组与拔牙+唑来膦酸+地塞米松组小鼠拔牙窝创口黏膜愈合未完全，拔牙窝表面牙龈组织不连续，周围牙龈可见明显肿胀及增生。Micro-CT对右上颌骨标本沿颌骨长轴进行扫描，拔牙+生理盐水组小鼠右上颌拔牙窝愈合良好，牙槽骨连续性良好，与正常区域的牙槽骨相比无明显异常，未见明显拔牙窝空虚影像。拔牙+唑来膦酸组与拔牙+唑来膦酸+地塞米松组小鼠牙槽窝内空虚，牙槽骨骨小梁结构和连续性丧失,拔牙窝内可见散在的高密度影像。上颌骨组织学HE染色，拔牙+药物组小鼠右上颌骨拔牙窝周围骨小梁纤细，骨小梁吸收呈“虫噬状”，纤维组织增生，拔牙窝周围可见多核巨细胞，吸收破坏骨质;拔牙+生理盐水组骨小梁排列整齐，连续性良好，致密，未见明显的多核巨细胞的形成，骨质无明显破坏。 2、流式细胞术:流式细胞术对小鼠外周血MDSC检测结果，模型小鼠外周血中MDSC所占比例明显下降(P＜0.05)，亚群M-MDSC比例也明显下降(P＜0.05)，而PMN-MDSC无明显变化(P＞0.05)，继续检测BRONJ小鼠模型外周血中单核细胞所占的比例，结果显示外周血中单核细胞所占比例降低（P＜0.05），说明了BRONJ小鼠中免疫功能失调，检测MDSC中CCR2+、MHC-Ⅱ+细胞比例的变化显示CCR2+MDSC无明显变化，而MHC-Ⅱ+MDSC比例明显下降，表现为免疫抑制功能减弱。 [结论]BRONJ小鼠模型MDSC分化受到了抑制，免疫抑制功能减弱，进一步验证了免疫功能失调导致BRONJ发生的机制，也为未来临床上应用免疫方法治疗BRONJ提供了方向。
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