摘要
目的： 阿尔茨海默病(Alzheimer''s Disease,AD)是一种进行性的中枢神经退行性病变，主要发生于老年及老年前期，具体表现为认知功能障碍和行为损害。本文从中医理论与运动生理学的角度出发，研究4周有氧运动结合大补元煎对调节AD大鼠细胞凋亡相关蛋白表达及信号通路PI3K/AKT/GSK-3β中关键蛋白表达的作用，综合理论探讨及实验研究，探索有氧运动结合大补元煎改善AD大鼠认知功能障碍的可能作用机制。 方法： 1.理论探讨：查阅梳理相关文献，归纳总结古代医家和运动生理学中对运动与AD的认知，探讨有氧运动对认知功能障碍的影响，为运动结合大补元煎改善AD认知功能障碍提供理论基础。 2.实验研究：将50只SPF级雄性SD大鼠使用随机数表的方法随机分为假手术组(sham组)、动物模型组(AD组)、有氧运动组(EX组)、大补元煎组(TCM组)、有氧运动+大补元煎组(EX+TCM组)，每组10只。AD组、EX组、TCM组和EX+TCM组建立AD大鼠模型采用在SD大鼠双侧海马区注射Aβ25-35的方法，sham组大鼠注射等量生理盐水替代Aβ25-35，操作方法相同。EX组和EX+TCM组进行4周的有氧运动、TCM和EX+TCM组给与4周的大补元煎灌胃。采用HE染色(苏木精-伊红染色法)观察海马组织病理形态改变，采用透射电镜观察神经元超微结构形态，采用Western Blot(免疫印迹试验)检测海马组织中AKT、pAKT、GSK-3β、pGSK-3β、β-catenin、Bcl-2、BAX、Caspase3蛋白表达水平，采用Morris水迷宫检测检测大鼠空间记忆能力。 结果： 1.建模结果：一般状态下，sham组大鼠情绪稳定，毛发整洁光泽，精神活跃，活动正常；AD组大鼠情绪易暴躁，状态萎靡，相对于sham组大鼠毛发干燥杂乱，精神不振。造模前对各组大鼠进行称重，称重结果显示各组大鼠体重无明显差异，造模后大鼠的体重增长速度对比发现，AD组、EX组、TCM组与EX+TCM组明显低于sham组。 2.HE染色结果显示：与sham组比较，AD组大鼠海马锥体细胞排列疏松紊乱，密度降低；与AD组比较,EX组、TCM组、EX+TCM组锥体细胞排列规律，细胞数量增加。 3.透射电镜结果显示：与sham组比较，AD组大鼠海马超微结构出现髓鞘样改变，线粒体肿胀模糊；与AD组比较,EX组、TCM组、EX+TCM组，电镜下可见髓鞘样改变减轻，线粒体肿胀改善。 4.WB结果显示：与sham组比较，AD组大鼠Bcl-2、pAKT及pGSK-3β的水平显著降低、β-catenin表达水平下降（P＜0.01）、Caspase3表达上调（P＜0.01）；与AD组比较,EX组、TCM组、EX+TCM组Bcl-2、pAKT及pGSK-3β表达升高，Caspase3表达水平下调，且EX+TCM组β-catenin水平升高而EX组、TCM组与AD组比较无统计学意义。 5.Morris水迷宫结果显示：与sham组比较，AD组大鼠逃避潜伏期显著延长，游泳总路程亦显著增加，空间探索实验中目标象限停留时间显著减少（P＜0.05）；与AD组比较,EX组、TCM组、EX+TCM组大鼠上平台潜伏期和游泳路程显著减少，目标象限停留时间增加。 结论： 1.AD病位在脑，以痰浊阻窍为标，肾元亏虚为本，元气亏虚贯穿于AD发生发展的过程，固本培元法是防治AD的有效治法。 2.运动结合大补元煎可以改善AD大鼠的学习记忆功能，缓解海马神经元损伤，且二者联合使用优于运动干预或药物干预单独使用。 3.运动结合大补元煎能增加AD大鼠海马中pAKT、Bcl-2蛋白表达，下调Caspase3水平，抑制神经元凋亡，发挥神经保护作用。 4.运动结合大补元煎防治AD的机制可能与调控PI3K/AKT/GSK-3β信号通路和下游蛋白β-catenin的表达有关。
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