摘要
目的：在尿毒症领域，IS加速肾性骨病及引起各种并发症的机制研究得到广泛关注，本篇文章主要研究IS对成骨细胞中Wnt/β-catenin传导通路影响及其机制，以及AHR、OAT有无参与这一传导通路。 方法：体外培养成骨细胞，不同时间（0h、6h、12h、24h、48h、72h）加入不同浓度的IS（0umol/L、100umol/L、500umol/L、1000umol/L、2000umol/L），以及在细胞中加入OAT抑制剂、AHR抑制剂，同时PTH激活成骨细胞中Wnt/β-catenin信号传导通路，使用Western bolt分析β-catenin的入核状态及β-catenin的活性。 结果：1.在成骨细胞中加入不同浓度的IS，测得β-catenin蛋白含量未见明显改变，表明IS未明显改变细胞中β-catenin蛋白含量的表达；2.在成骨细胞中，加入同一浓度的IS，干预不同的时间，检测β-catenin蛋白含量，结果表示细胞中蛋白含量未见明显增加或减少；3.在成骨细胞中，加入同一浓度的IS，干预不同时间，检测细胞中AHR的表达，与对照组相比，随着时间的增加，AHR的表达逐渐增多，表明IS激活了成骨细胞中AHR的活性；4.在成骨细胞中，加入PTH，干预不同时间，检测细胞核中β-catenin蛋白含量的表达，随着PTH作用时间的延长，细胞核中β-catenin蛋白的表达逐渐增多；5.培养成骨细胞，将细胞分为对照组、IS组、OAT抑制剂组、IS+OAT抑制剂组、AHR抑制剂组、IS+AHR抑制剂组，共6组，所有细胞均加入PTH，检测细胞核内的AHR及β-catenin表达情况，与对照组相比，IS组：细胞核中的AHR表达增加，而细胞核内β-catenin表达减少；OAT抑制组：细胞核中AHR表达减少，β-catenin表达也减少；IS+OAT抑制剂组：与IS组相比，细胞核内AHR表达均明显增减少，而β-catenin表达略增高；AHR抑制剂组：测得细胞核中AHR与β-catenin的表达均减少，与在细胞中加入OAT抑制剂效果一致；IS+AHR抑制剂组：与IS组相比较，检测细胞核中的AHR表达明显减少，而β-catenin表达略增加。6.在成骨细胞中，分别加入PTH、IS、AHR抑制剂，结果显示AHR抑制剂抑制了IS对Runx2的调控，表明IS是通过AHR对Runx2进行调控。 结论：在成骨细胞中，添加PTH可激活细胞中Wnt/β-catenin信号传导通路，在Wnt/β-catenin信号传导通路激活的状态下，IS可以通过OAT进入成骨细胞中，并通过AHR抑制成骨细胞中Wnt/β-catenin信号传导通路的激活。
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