摘要
目的： 评估活性氧响应性含镁微球（Mg@PBE/PLGAMSs）的体内外生物相容性，并评估其对椎间盘退变的作用。 方法： （1）将不同浓度的Mg@PBE/PLGAMSs与RAW264.7细胞共孵育，通过CCK-8实验检测不同浓度的Mg@PBE/PLGAMSs对细胞活力的影响。将Mg@PBE/PLGAMSs与大鼠红细胞共孵育，通过溶血实验观察该微球的红细胞毒性，评价微球的体外生物相容性。 （2）将Mg@PBE/PLGAMSs注射入大鼠的椎间盘，对椎间盘内注射微球后获得的大鼠重要脏器（心、肝、脾、肺、肾）进行石蜡切片制作及HE染色，评价该微球的体内生物相容性。 （3）通过针刺建立大鼠尾椎椎间盘退变模型，并向模型椎间盘中注射Mg@PBE/PLGAMSs。在造模前与造模4周后，通过电子计算机断层扫描（CT）观察大鼠的椎间隙改变、分析椎间盘高度指数（DHI）变化；通过1.5T核磁共振（MRI）检测椎间盘髓核区域的信号强度变化、观察椎间盘结构并行Pfirrmann分级；通过组织病理学染色（HE染色、Masson染色及SafraninO染色）观察椎间盘组织形态学变化；通过免疫组织化学染色（IHC）观察椎间盘蛋白聚糖的含量、基质降解酶、氧化应激水平及炎症水平的变化。通过上述方法综合评估大鼠椎间盘的退变程度，评价Mg@PBE/PLGAMSs在体内对椎间盘退变的作用。 结果： （1）CCK-8实验结果显示在低于2mg/mL的浓度范围内，该微球对细胞活力没有显著影响，具有较好的生物相容性。溶血实验结果显示该微球无明显红细胞毒性，具有低溶血率，在体外证明了微球的安全性。 （2）椎间盘内注射微球后获得的大鼠重要脏器（心、肝、脾、肺肾）的HE染色结果显示该微球无明显组织毒性，具有较好的体内生物相容性。 （3）在体内研究中，造模4周后，模型组里的大鼠CT检查结果显示椎间隙变窄，椎间盘高度和DHI显著下降；MRI检查显示髓核区域信号强度减弱，Pfirrmann评级升高；HE染色、Masson染色及SafraninO染色结果显示椎间盘髓核组织和细胞外基质含量明显减少，纤维增生，纤维环结构紊乱；IHC结果显示椎间盘内蛋白聚糖的含量显著降低，而基质降解酶、氧化应激水平及炎症水平显著升高。以上结果综合证明椎间盘发生了严重退变。而在实验组，注射活性氧响应性含镁微球（Mg@PBE/PLGAMSs）可明显缓解上述变化。 结论： 活性氧响应性含镁微球（Mg@PBE/PLGAMSs）具备较好的体内外生物相容性。通过体内实验证明了该微球具有良好的抗氧化抗炎作用，能有效阻止椎间盘退变，为椎间盘退变的治疗提供新策略。
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