摘要
目的： 本研究旨在探讨胰腺星状细胞(Pancreatic Stellate Cell,PSC)对胰腺癌细胞铁死亡敏感性的作用及其确切机制，为针对肿瘤微环境的治疗提供新的方向与策略。 方法： （1）显微镜观察胰腺星状细胞与胰腺癌细胞共培养后形态变化，Western Blot及免疫荧光检测胰腺星状细胞α-SMA表达情况； （2）CCK8法、实时荧光定量PCR、Western Blot、谷胱甘肽检测试剂盒、丙二醛检测试剂盒、C11-BODIPY染料检测共培养条件下胰腺癌细胞的细胞活性，铁死亡相关指标mRNA和蛋白水平，细胞内还原型谷胱甘肽水平，丙二醛含量及脂质活性氧水平； （3）ELISA法检测胰腺星状细胞分泌的HGF含量；运用上述方法检测外源性加入HGF条件以及抑制和干扰c-MET后胰腺癌细胞的细胞活性，铁死亡相关指标mRNA和蛋白水平，细胞内还原型谷胱甘肽水平，丙二醛含量及脂质活性氧水平； （4）构建小鼠胰腺癌皮下瘤模型，体内验证PSCs与HGF体内抑制胰腺癌生长情况； （5）运用生物信息学方法分析c-MET在胰腺癌组织中c-MET的表达水平和临床意义，及其与铁死亡指标的相关性。 结果： （1）与胰腺癌细胞共培养后，胰腺星状细胞形态改变，α-SMA表达增加，提示胰腺星状细胞活化； （2）在铁死亡诱导剂Erastin的作用下，与活化的胰腺星状细胞共培养后的胰腺癌细胞GPX4蛋白与mRNA表达水平升高，细胞活力、细胞内还原型谷胱甘肽水平升高；脂质活性氧，丙二醛含量降低； （3）活化的胰腺星状细胞能够大量分泌HGF；在铁死亡诱导剂Erastin的作用下，外源性添加HGF后，胰腺癌细胞GPX4蛋白表达升高，细胞活力、细胞内还原型谷胱甘肽升高；脂质活性氧，丙二醛含量降低； （4）在铁死亡诱导剂Erastin的作用下，药物抑制或基因干扰HGF受体c-MET后的胰腺癌细胞SLC7A11与GPX4表达降低，细胞活力、细胞内还原型谷胱甘肽降低；脂质活性氧，丙二醛含量升高； （5）在小鼠胰腺癌异种移植模型中，胰腺星状细胞与HGF在体内抵抗铁死亡诱导剂的肿瘤杀伤效果； （6）数据库分析显示c-MET在人胰腺癌中高表达，与病人生存期呈负相关，与铁死亡抵抗相关指标呈正相关。 结论： 胰腺癌细胞促进胰腺星状细胞活化，活化的胰腺星状细胞大量分泌HGF被胰腺癌细胞利用，促进胰腺癌细胞的铁死亡抵抗。
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