摘要
目的： 本研究通过构建葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的炎症性肠病（Inflammatory Bowel Disease,IBD）小鼠模型，明确羌活醇（Notopterol）对IBD小鼠的治疗作用，并对其相关机制进行初步探究，为开发安全有效地治疗IBD的药物提供理论依据。 方法： 1、构建IBD小鼠模型 将C57BL/6小鼠随机分为正常组、阴性给药组、模型组、羌活醇组（每组10只）。模型组、羌活醇组的小鼠饮用含DSS（2%）的饮用水诱导炎症性肠病模型，正常组、阴性给药组给予正常饮用水。造模过程中，阴性给药组、羌活醇组的小鼠每天给予腹腔内注射羌活醇溶液（40mg/kg），正常对照组、模型组则给予等量的PBS腹腔内注射。10天后处死小鼠，收集各组小鼠的结直肠、脾脏组织进行下一步检测。 2、羌活醇对IBD小鼠的治疗作用 实验期间，每天称量小鼠的体重变化，观察记录其粪便性状及便血情况，计算疾病活动指数（DAI）评分；实验结束后测量各组小鼠的结肠长度，通过苏木精-伊红染色法（HE）对各组小鼠的结肠组织进行病理学分析，并测定结肠组织中MPO的活性。 3、羌活醇对IBD小鼠结肠组织中细胞因子的影响 酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定小鼠结肠组织中促炎细胞因子（TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-21、IL-17A）的水平，实时荧光定量PCR（qPCR）测定趋化因子（MCP-1、RANTES）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达。 4、羌活醇对IBD小鼠中TH17细胞免疫反应的影响 qPCR测定小鼠结肠及脾脏组织中TH17细胞相关细胞因子IL-17A及其转录因子RORγt的表达；蛋白质印迹法（WB）检测各组小鼠的结肠组织中IL-6/JAK2/STAT3信号通路相关蛋白IL-6、JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3的表达。 结果： 1、与正常组相比，模型组小鼠的体重明显下降，DAI评分增高，结肠长度缩短。另外模型组小鼠结肠组织还观察到明显的黏膜损伤、炎性细胞大量浸润，结肠组织病理学评分增高，说明IBD小鼠造模成功。 2、阴性给药组与正常组小鼠在宏观表现（一般症状、体重变化、结肠长度）及微观表现（结肠组织病理学）上均未见无明显差异。 3、与模型组相比，羌活醇能明显缓解IBD小鼠的体重下降幅度及结肠缩短程度，明显降低DAI评分、组织病理学评分及结肠组织中MPO的活性，其对IBD小鼠有一定的治疗作用。 4、与模型组相比，羌活醇组小鼠的结肠组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-21、IL-17A、MCP-1、RANTES、ICAM-1的表达水平均明显下降，其结肠组织、脾脏组织中IL-17A及RORγt的表达水平也相对下调。另外，羌活醇还能明显降低IBD小鼠中IL-6、p-JAK2、p-STAT3的蛋白含量。 结论： 本研究显示了羌活醇对IBD模型小鼠有一定的治疗作用，其机制可能与抑制了IL-6/JAK2/STAT3信号通路相关蛋白的表达，从而影响了TH17细胞免疫反应相关。因此，羌活醇有可能成为治疗IBD的一种潜在性药物。
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