摘要
虎耳草(Saxifraga stolonifera Meerb.)为虎耳草科(Saxifragaceade)虎耳草属（Saxifraga Tourn.ex L.）多年生常绿草本植物，具有祛风、清热、凉血解毒等功效。现代药理研究表明，其提取物具有抗炎、抑菌、杀菌、抗癌、抗氧化等药理活性，能作为观赏植物，具有净化污水的作用。目前水杨酸（SA）、硝普钠（SNP，NO供体）、茉莉酸甲酯（MeJA）等诱导子在调控植物中药用成分的研究较多，能提高多种植物的次生代谢产物的含量。本试验一方面以虎耳草的幼嫩叶片、匍匐茎为外植体，在不同激素配比的培养基上进行无菌培养，探究虎耳草的组培条件，为虎耳草组织培养体系奠定基础。另一方面通过添加不同浓度的SA、NO和MeJA来提高虎耳草的愈伤组织和组培苗中岩白菜素、没食子酸、原茶儿酸等药用成分的含量，为栽培虎耳草提高其相应次生代谢产物含量提供依据。主要研究结果如下： 1.虎耳草组培条件。以虎耳草的幼嫩叶片和匍匐茎为外植体，探究虎耳草组培条件，结果如下：（1）虎耳草叶片较优灭菌组合处理为：70%酒精40s和0.1%HgCl210min；（2）虎耳草叶片愈伤组织诱导的较优处理为：MS+2mg/L6-BA+0.15mg/L NAA；（3）虎耳草叶片愈伤组织增殖的较优处理为：MS+2mg/L6-BA+0.3mg/L NAA；（4）虎耳草匍匐茎丛生芽的增殖较佳处理组合为：MS+0.2mg/L6-BA+0.1mg/L NAA；（5）虎耳草匍匐茎丛生芽生根的较佳条件为：1/2MS+30g/L蔗糖+0.04mg/L2,4-D。 2、不同诱导子对虎耳草愈伤组织6种成分的影响。对比SA、SNP和MeJA对虎耳草叶片愈伤组织的中6种成分的结果，其中60μmol/L SA处理的虎耳草愈伤组织中没食子酸和槲皮苷的含量最高，分别为0.1514%和0.0132%；40μmol/L SA和SNP处理的虎耳草愈伤组织中原茶儿酸和岩白菜素含量最高，分别为0.0149%和0.1554%；80μmol/L SNP处理的虎耳草愈伤组织中绿原酸含量最高，为0.0533%；20μmol/L SNP处理下虎耳草的愈伤组织中的槲皮素含量最高，为0.0106%。在合适浓度范围内，SA促进虎耳草愈伤组织中没食子酸、原茶儿酸和槲皮苷含量的积累效果比SNP和MeJA的好，而SNP促进虎耳草愈伤组织中岩白菜素、绿原酸和槲皮素积累效果比SA和MeJA的好。 3、不同诱导子对虎耳草组培苗中5种成分的影响。使用不同浓度的SA、SNP和MeJA分别喷施虎耳草的组培苗，处理时间为14d和28d。比较SA、SNP和MeJA对虎耳草组培苗的所有处理中，200μmol/L SNP处理虎耳草组培苗28d的绿原酸含量最高，为0.0779%，是对照组的1.80倍；50μmol/L SNP处理虎耳草组培苗28d的没食子酸含量和槲皮苷含量最高，分别为0.1643%和0.0192%，是对照组的7.50倍和1.22倍；100μmol/L SA处理虎耳草组培苗28d的原茶儿酸和浸出物含量最高，分别为0.0247%和4.6600%，是对照组的1.25倍和1.16倍；300μmol/L MeJA处理虎耳草组培苗14d的岩白菜素最高，为1.1912%，是对照组的2.94倍。在虎耳草组培苗培养过程中喷施合适浓度的诱导子有利于提高虎耳草组培苗中没食子酸、原茶儿酸、岩白菜素、绿原酸、槲皮苷的含量，SNP对虎耳草组培苗中没食子酸、绿原酸和槲皮苷促进积累效果较好，SA对虎耳草组培苗中原茶儿酸促进积累效果较好，MeJA对虎耳草组培苗中岩白菜素积累效果较好。
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