摘要
为了研究绞股蓝多糖(Gynostemma pentaphyllum polysaccharides,GPP)对热应激(Heat Stress,HS)小鼠小肠氧化应激损伤的保护作用,并为绞股蓝多糖的进一步开发和应用提供理论依据。本研究以8周龄小鼠为实验动物,随机分为5组:空白对照组、HS组、GPP-L(50mg/kg)、GPP-M组(100mg/kg)和GPP-H组(200mg/kg),主要采用组织学技术等研究方法对各组小鼠十二指肠、空肠和回肠的形态结构以及杯状细胞、上皮内淋巴细胞、嗜银细胞以及紧密连接蛋白ZO-1、OCLN和CLDN-1进行观察分析,并对小肠各段的总抗氧化能力,谷胱甘肽、丙二醛和溶菌酶含量以及总超氧化物歧化酶、酸性磷酸酶、碱性磷酸酶的活性进行检测,结果发现: 1、与HS组相比,GPP-L组小鼠在20-21d时日增重增加(P<0.05),GPP-M组小鼠在19-20d时日增重增加(P<0.05);不同剂量的GPP组小鼠小肠长度和小肠指数与HS组并无显著差异。 2、不同剂量的GPP组均可缓解HS条件下小鼠小肠各段形态结构损伤。与HS组相比,GPP-L组小鼠小肠各段和GPP-M组小鼠空肠绒毛高度显著增加(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠十二指肠和空肠以及GPP-H组小鼠十二指肠隐窝深度显著降低(P<0.05),GPP-L组和GPP-M组空肠隐窝深度显著高于HS组(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠十二指肠和空肠V/C比值显著增加(P<0.05)。 3、与HS组相比,GPP-L组和GPP-M组小鼠小肠各段以及GPP-H组小鼠十二指肠和空肠杯状细胞数量显著增加(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠小肠各段以及GPP-H组小鼠十二指肠和空肠上皮内淋巴细胞数量显著降低(P<0.05);GPP-L组小鼠小肠各段以及GPP-M组小鼠十二指肠和回肠嗜银细胞数量显著增加(P<0.05)。 4、不同剂量的GPP组均可增加HS条件下小鼠小肠各段紧密连接蛋白ZO-1、OCLN和CLDN-1表达量。其中与HS组相比,GPP-L组小鼠小肠各段紧密连接蛋白ZO-1、OCLN和CLDN-1表达量显著增加(P<0.05);GPP-M组小鼠十二指肠和回肠紧密连接蛋白ZO-1表达量显著增加(P<0.05)、空肠和回肠紧密连接蛋白OCLN表达量显著增加(P<0.05)以及小肠各段紧密连接蛋白CLDN-1表达量显著增加(P<0.05);GPP-H组小鼠回肠连接蛋白ZO-1表达量显著增加(P<0.05)。 5、不同剂量的GPP组均可显著增强HS条件下小鼠小肠各段抗氧化性。各GPP组之间,GPP-L组小鼠空肠和回肠T-AOC活性较GPP-H组显著增高(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠小肠各段GSH含量较GPP-H组显著增高(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠十二指肠和回肠GSSG/GSH比值较GPP-H组显著增高(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠十二指肠T-SOD活性较GPP-H组显著增高(P<0.05);GPP-L组和GPP-M组小鼠小肠各段MDA含量较GPP-H组显著降低(P<0.05)。 6、不同剂量的GPP组均可增强HS条件下小鼠小肠各段非特异免疫性。其中与HS组相比,GPP-L组小鼠十二指肠和空肠ACP活性显著降低(P<0.05)、空肠和回肠AKP活性显著降低(P<0.05);GPP-M组小鼠十二指肠和空肠ACP活性显著降低(P<0.05)、十二指肠和回肠AKP活性显著降低(P<0.05);GPP-H组小鼠小肠各段ACP和AKP活性显著降低(P<0.05);GPP-L组、GPP-M组和GPP-H组小鼠小肠各段LZM含量显著增高(P<0.05)。 综上所述,GPP各剂量组均对HS小鼠小肠氧化应激具有一定保护作用,可以缓解小鼠小肠各段形态结构损伤,增强小肠抗氧化性和非特异性免疫能力,其中GPP-L组效果优于其他GPP组。