摘要
目的 脊髓损伤（Spinalcordinjury,SCI）是临床上中枢神经系统（Centralnervoussystem，CNS）的严重的破坏性外伤性疾病，可造成肢体运动、感觉障碍，严重的可危及病人生命，并会给患者及社会带来严重的经济负担和精神压力。我国每年都有庞大数量的新发脊髓损伤病例，总人数已突破百万。由于中枢神经系统的恢复十分困难，目前治疗脊髓损伤手段十分有限，并不能很好地解决其带来的后遗症，因此脊髓损伤的治疗仍是一项艰巨的任务。 了解脊髓损伤的病理生理学过程对于更好地治疗脊髓损伤十分必要。脊髓损伤一般分为原发性损伤及继发性损伤两个阶段。原发性损伤的范围十分有限，而继发性损伤过程中引发瀑布式级联炎症反应，从而会扩大损伤面积并且不利于脊髓损伤的恢复。泊马度胺（Pomalidomide,Pom）是沙利度胺类药物的第三代衍生物，已被证明具有强烈的抗炎作用。然而，泊马度胺对于脊髓损伤的治疗效果并不清楚。本研究旨在深入研究泊马度胺在脊髓损伤发生后抑制炎症促进运动功能恢复和神经再生的作用及机制，明确泊马度胺治疗脊髓损伤的病理生理学意义，从而为治疗脊髓损伤提供新的治疗手段和思路。 实验方法 1、建立小鼠脊髓夹闭损伤模型，严格按分组给药，观察和评估实验组与对照组术后3、7、14、21、28天的行为学变化； 2、在损伤后第14天取脊髓冰冻切片进行油红O染色及尼氏染色观察小鼠脊髓损伤区的大小； 3、在损伤后第28天通过尼氏染色及免疫荧光染色观察小鼠脊髓前角运动神经元的丢失情况； 4、在损伤后第7天通过尼氏染色、免疫组化染色并提取组织蛋白进行Westernblot实验观察小鼠脊髓损伤后神经元凋亡情况； 5、在损伤后3天及7天观察脊髓大体的血肿面积大小，并通过HE染色及免疫荧光染色观察实验组与对照组的炎症细胞浸润情况； 6、在损伤后3天及7天提取脊髓组织RNA通过qPCR分析小鼠脊髓损伤后炎症因子mRNA的表达情况； 7、建立体外BV2细胞的LPS炎症刺激模型，严格分组加药，观察胶质细胞的形态变化情况，并提取细胞RNA通过qPCR分析BV2细胞LPS刺激后炎症因子mRNA的表达情况。 实验结果 1、成功建立小鼠脊髓损伤夹闭模型，足迹试验及BMS评分证明泊马度胺促进小鼠脊髓损伤后运动功能恢复； 2、染色结果提示泊马度胺抑制小鼠脊髓损伤后损伤区域的扩大； 3、染色结果提示泊马度胺减轻小鼠脊髓损伤后前角运动神经元的丢失； 4、染色及Westernblot实验提示泊马度胺抑制小鼠脊髓损伤后前角运动神经元的凋亡； 5、大体观及染色结果提示泊马度胺减轻了小鼠脊髓损伤后的脊髓血肿，抑制了炎症细胞的聚集； 6、脊髓组织qPCR结果提示马度胺抑制小鼠脊髓损伤后组织炎症介质的释放； 7、成功建立了体外BV2细胞的LPS炎症刺激模型，结果提示泊马度胺在体外抑制BV2细胞的炎症反应。 结论 我们的研究发现泊马度胺具有广泛的抑制炎症的效果，可在急性脊髓损伤的继发性损伤过程中发挥有效的抑制炎症的作用，能控制炎症损伤的进一步扩大加重，从而对于脊髓损伤后的功能恢复有一定程度的促进作用。这些发现首次揭示了泊马度胺抑制脊髓损伤后神经炎症的作用，并为脊髓损伤后的治疗研究提供了一定的基础理论。
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