摘要
目的： 通过建立体内体外模型来探索Hsa-miR-421表达水平对喉鳞癌增殖、侵袭、转移和裸鼠体内成瘤能力等细胞生物学功能的影响。 方法： 运用实时荧光定量技术（qRT-PCR）检测喉鳞癌细胞（AMC-HN-8和FD-LSC-1）和人胚肾细胞（HEK293T）中hsa-miR-421的表达差异；在喉鳞癌细胞系中转染hsa-miR-421mimics、hsa-miR-421mimicsNC和hsa-miR-421inhibitor、hsa-miR-421inhibitorNC，通过qRT-PCR检测转染效率；CCK-8和克隆形成检测细胞增殖；CCK-8检测喉鳞癌细胞对顺铂的敏感性；Transwell实验检测细胞侵袭和迁移；构建喉鳞癌细胞裸鼠移植瘤模型，瘤体内注射hsa-miR-421antagomir/hsa-miR-421antagomirNC，观察hsa-miR-421对喉鳞癌细胞体内成瘤能力的影响；免疫组织化学染色检测增殖标志物及EMT关键分子标志物。最后，利用两种在线生信分析数据库（TargetScan、ENCORI）预测hsa-miR-421可能结合的下游靶基因。 结果： Hsa-miR-421在AMC-HN-8、FD-LSC-1细胞中的表达量升高，分别是HEK293T细胞的3.32±1.27倍、3.61±1.57倍(Plt;0.05)；敲降hsa-miR-421抑制喉鳞癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力、顺铂敏感性增加；过表达hsa-miR-421后，结果与之相反(Plt;0.05)。敲降hsa-miR-421在裸鼠体内抑制喉鳞癌细胞的成瘤能力(Plt;0.05)。免疫组化结果证明hsa-miR-421在裸鼠体内抑制喉鳞癌细胞的生长和ETM过程。生物信息学方法预测到hsa-miR-421可能与基因PDCD4靶向结合。 结论： Hsa-miR-421在喉鳞状细胞癌中表达显著升高，hsa-miR-421作为促癌基因促进喉鳞癌细胞增殖、侵袭、迁移等恶性进展。因此hsa-miR-421可以作为喉鳞癌早诊、治疗及预后的潜在生物标志物。
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