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姜黄素通过上调SIRT1减轻GSE-1细胞γ射线辐射损伤

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目的: 本研究旨在探讨姜黄素抗人胃粘膜上皮细胞(GSE-1细胞)辐射损伤的机制,明确姜黄素(Cur)通过上调沉默信息调节因子1(SIRT1),进而减轻GSE-1细胞γ射线辐射损伤的机制,为辐射相关胃损伤的治疗提供新的理论依据。 方法: 试验对象选用人GSE-1细胞,结合课题组前期研究,本研究辐射剂量选用4Gy,观察时间选用辐照后24h开展以下实验。本研究采用辐射保护剂氨磷汀(WR-2721)作为阳性药物对照。 1.第一部分:实验分组:空白对照组、Cur5μM组、Cur10μM组、Cur20μM组,MTT法检测细胞活力,明确姜黄素对GSE-1细胞活力的影响。 2.第二部分:实验分组:空白对照组、单纯辐照组、辐照+Cur5μM组、辐照+Cur10μM组、辐照+Cur20μM组、辐照+WR-2721组,MTT法检测细胞活力,明确姜黄素对γ射线辐射损伤的GSE-1细胞活力的影响。 3.第三部分:实验分组:空白对照组、单纯辐照组、辐照+Cur5μM组、辐照+Cur10μM组、辐照+Cur20μM组,MDA-TBA法检测各组丙二醛(MDA)浓度,WST-8法检测各组超氧化物歧化酶(SOD)活性,Westernblot检测各组SIRT1蛋白含量,明确姜黄素对γ射线辐射损伤的GSE-1细胞内MDA、SOD氧化应激指标的影响以及细胞内SIRT1蛋白表达的影响。 4.第四部分:实验分组:空白对照组、Cur20μM组、单纯辐照组、辐照+Cur20μM组、辐照+Cur20μM+SIRT1抑制剂(EX527)组,MTT法检测各组细胞活力,MDA-TBA法检测各组MDA浓度,WST-8法检测各组SOD活性,Westernblot检测各组SIRT1蛋白含量,明确加入SIRT1抑制剂EX527后对姜黄素减轻GSE-1细胞γ射线辐射损伤作用的影响。 结果: 1.在本实验浓度范围内,不同浓度姜黄素作用于GSE-1细胞后,各组细胞增殖活力无差异(Pgt;0.05),说明姜黄素对GSE-1细胞增殖活力无明显影响。 2.在本实验浓度范围内,与单纯辐照组相比,辐射损伤的GSE-1细胞经不同浓度姜黄素处理后,细胞活力呈浓度依赖性上升,差异具有统计学意义(P<0.05)。与WR-2721相比,当姜黄素浓度20μM时,达到了与WR-2721相似的作用(P>0.05)。 3.在本实验浓度范围内,与单纯辐照组相比,辐射损伤的GSE-1细胞在不同浓度姜黄素处理后,MDA浓度呈浓度依赖性下降,SOD活力呈浓度依赖性上升(P<0.01),说明姜黄素可提高γ射线辐射损伤的GSE-1细胞抗氧化应激能力。 4.在本实验浓度范围内,与单纯辐照组相比,辐射损伤的GSE-1细胞在加入不同浓度姜黄素处理后其SIRT1蛋白呈浓度依赖性上升,(P<0.01),且20μM姜黄素时效果最明显,说明姜黄素可提高γ射线辐射损伤的GSE-1细胞SIRT1蛋白的表达。 5.辐射损伤的GSE-1细胞在姜黄素处理组中加入SIRT1抑制剂EX527后,细胞活力下降,MDA浓度上升,SOD活性下降(Plt;0.01),说明加入EX527后,减弱了姜黄素对γ射线辐射损伤的GSE-1细胞的保护作用。 结论: 姜黄素可通过增强GSE-1细胞抗氧化应激损伤的能力,从而减轻GSE-1细胞γ射线辐射损伤,其机制与上调SIRT1蛋白有关。

刘旺

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胃损伤 姜黄素 辐射保护 GSE-1细胞 氧化应激

硕士

临床医学(外科学)

李峰

2021

南华大学

中文

R2