摘要
微藻作为海洋双壳贝类的重要食物来源，因其种类丰富、分布广泛、容易大规模培养的特性，己成为贝类养殖业中的食物饵料首选。双壳贝类作为一种滤食性生物，通过其独特的摄食机制对周围水体中的微藻进行选择性摄取，具体表现为优先摄入其偏好性食物颗粒，而对其它颗粒以假粪的形式排出，这一选择性摄食机制的存在使得海洋双壳贝类能够实现能量利用的最大化。通过对双壳贝类选择性摄食机制的研究，进而选择合适的微藻饵料进行贝类养殖中的精确投喂，将在水产养殖中产生良好的应用前景。目前，对于双壳贝类选择性摄食背后的生理机制一直是贝类养殖相关研究的热点，贝类最佳饵料微藻的筛选也是亟待解决的水产养殖中难题之一。目前，己有相关报道表明C型凝集素（C-typeLectin)在部分贝类（如牡蛎）的选择性摄食中可能发挥了重要作用。这不仅为贝类选择性摄食的分子机制研究提供了线索，也拓展了人们对于凝集素分子功能的认知。随着越来越多的C型凝集素在海洋双壳贝类中被发现，其分子多样性背后的功能多样性也逐渐引起了人们的关注。己有研究表明，部分双壳贝类摄食器官（如鳃）中分泌的黏液里含有大量不同的C型凝集素，推测这些结构特性各异的C型凝集素能通过对微藻饵料表面的碳水化合物特异性识别和结合，从而在海洋双壳贝类的选择性摄食中发挥一定的作用。 本论文以浙江沿海常见的经济养殖贝类——厚壳贻贝(Mytiluscoruscus)为研究对象，首先利用绝对荧光定量PCR技术结合水体中微藻的特异性定量，开展了厚壳贻贝对4种常见微藻饵料的摄食偏好研究;同时，为进一步探宄4种微藻饵料的投喂效果及对厚壳贻贝的生理生化影响，通过4种微藻饵料28天的单一投喂方式，结合气相色谱-质谱联用（GasChromatography-MassSpectrometer,GC-MS)分析技术，对单一藻类喂养下厚壳贻贝软组织的脂肪酸组成及含量进行了分析。此外，为进一步探讨不同藻类饲喂对厚壳贻贝体内微生物的群落影响，通过16SrRNA高通量测序技术对喂养后的厚壳贻贝消化腺微生物的群落结构进行了分析。上述研究为深入了解厚壳贻贝对不同饵料微藻的摄食偏好，以及不同饵料微藻饲喂厚壳贻贝后对其产生的影响奠定了基础。为进一步了解凝集素分子在厚壳贻贝选择性摄食中的可能作用，深入探究厚壳贻贝对微藻饵料识别背后的可能分子机制，我们对厚壳贻贝C型凝集素基因(M.coruscusC-typelectin1,McCTL1)开展了序列特征分析、基因表达量检测、编码蛋白的原核表达和重组蛋白纯化及蛋白活性检测等，以期了解该C-型凝集素在厚壳贻贝摄食以及免疫中可能的双重作用及其机制。以上实验结果表明，厚壳贻贝对牟氏角毛藻(Chaetocerosmuelleri)和湛江等鞭金藻(Isochrysiszhanjiangensis)表现出优先摄食性，利用这两种微藻饵料能够对厚壳贻贝取得较好的喂养效果。此外实时荧光定量PCR的结果表明厚壳贻贝C型凝集素McCTL1在鳃中特异性表达，并且在细菌侵染、饥饿、喂食下均有不同的表达差异变化，进一步的重组蛋白功能表明，McCTL1对革兰氏阳性菌和阴性菌均有一定的抑制和凝集效果，对青岛大扁藻(Platymortashelgolandica)和湛江等鞭金藻(Isochrysiszhanjiangensis)有凝集效果，并且会对厚壳贻贝的摄食产生影响，由此说明，McCTL1具有包括影响厚壳贻贝选择性摄食和免疫在内的复杂生理功能。 本论文的研究结果一方面为深入了解厚壳贻贝的选择性摄食及其背后的影响机制奠定了基础，同时丰富了海洋双壳贝类C型凝集素的科学认知;另一方面，利用选择性摄食机制对微藻饵料进行精准筛选，也为贝类在水产养殖中的饵料优化提供了方法与线索。
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