摘要
目的：基于网络药理学研究化湿行瘀清热方治疗口腔扁平苔藓的分子机制，并用分子对接和临床实验验证。 方法：检索TCMSP数据库和UniProt数据库，筛选药物活性成分和对应靶点，基于GeneCards数据库获得疾病基因，应用Cytoscape软件构建“药物-疾病调控网络”，使用String数据库进行蛋白互作网络（PPI）分析，运用R软件包进行基因本体论（GO）生物功能富集分析和京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，预测化湿行淤清热方治疗口腔扁平苔藓的作用机制，使用AutoDock软件对化湿行瘀清热方中的关键活性化合物和PPI中的核心蛋白进行分子对接验证。最后对化湿行淤清热方治疗口腔扁平苔藓进行疗效观察，取口腔扁平苔藓治疗组患者治疗前后和健康对照组血液上清液，进行酶联免疫吸附试验（ELISA）实验，检测TNFα，IL4和CXCL8的表达水平变化。 结果：化湿行瘀清热方含有166个活性成分和255个治疗靶点，在GeneCards数据库中共检索到387个与口腔扁平苔藓有关的疾病靶点。治疗靶点与疾病靶点取交集，最终得到58个药物-疾病共同靶点，化合物-疾病调控网络显示化湿行淤清热方治疗口腔扁平苔藓的关键药物活性成分为槲皮素，木犀草素，汉黄芩素，山奈酚，黄芩黄素，β-胡萝卜素，4，5，7-三羟黄烷酮、甘草查尔酮a、芒柄花黄素和谷固醇。核心PPI网络显示Akt1、VEGFA、TNFα、ICAM1、MMP9等14个关键疾病靶点。58个药物-疾病共同靶点共富集到2169个GO项目和131个KEGG项目，功能富集分析与通路富集分析结果显示化湿行淤清热方通过多靶点、多通路治疗口腔扁平苔藓，尤其是IL17信号通路，它与口腔扁平苔藓的发生发展密切相关。通过分子对接结果，我们发现关键药物活性成分能够与核心PPI网络中14个关键疾病靶点结合，并具有良好的亲和力。ELISA实验结果显示口腔扁平苔藓患者组血清TNFα、IL4和CXCL8表达水平高于对照组，经化湿行瘀清热方治疗后患者血清中的表达水平降低。临床疗效观察显示：经化湿行瘀清热方治疗8周后，口腔扁平苔藓患者的临床症状显著改善。 结论：本研究通过网络药理学揭示了化湿行瘀清热方治疗口腔扁平苔藓的分子机制，可能与抑制IL17信号通路中相关细胞因子表达相关，临床试验也证实了化湿行淤方对口腔扁平苔藓的治疗作用，临床疗效显著，不良反应少。
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