摘要
研究背景：天然雌激素（雌酮、雌二醇和雌三醇）是内分泌干扰物[1]的成员，能干扰和破坏内分泌系统。近几十年来，由于天然雌激素的滥用，人类和动物排泄进入水体的雌激素远远超出安全阈值，而废水处理厂并不能完全处理这些污染物。残余的雌激素会对生物造成不良影响，关于17β-雌二醇在模式生物发育、神经发育和血管生成等方面的毒性研究已有很多报道，但对于雌酮和雌三醇在体内的毒性作用的报道却很少，我们对此知之甚少。因此探究天然雌激素对生物的具体影响具有重要意义。 研究方法：在本研究中，我们对雌激素在斑马鱼胚胎和幼鱼的发育毒性进行了综合分析，主要探究雌酮、17β-雌二醇和雌三醇在存活率、心率、体长和畸形率四个方面的影响并且对三种雌激素的发育毒性进行了比较。此外，我们通过行为学实验对斑马鱼的运动能力进行了检测；通过对绿色荧光标记运动神经的Tg(hb9:EGFP)型转基因斑马鱼进行雌激素暴露来观察化合物对神经发育的影响；并利用蛋白免疫检测技术检测微管相关蛋白(Tau)和细胞骨架相关蛋白(Gfap)水平；以及检测神经发育相关基因(gap43,gfap,mbp,shha,syn2a,elavl3)的mRNA表达水平。同时，我们通过对体内血管被绿色荧光标记的Tg(flk:EGFP)型转基因斑马鱼进行暴露观察化合物对血管生成的影响；对血管生成相关蛋白Vegfa及其受体Vegfr-2进行蛋白免疫检测；对Vegfa受体基因(flt-1和kdr)的mRNA表达水平进行检测。 实验结果：我们的结果表明天然雌激素会导致发育毒性，体长缩短、心率减慢，畸形率增加，17β-雌二醇在降低存活率、体长、心率和提高畸形率方面与雌酮和雌三醇相比有显著性差异，证明17β-雌二醇的发育毒性明显高于雌酮和雌三醇。同时，中高浓度的雌激素暴露会抑制斑马鱼的运动能力，导致运动神经的形态改变，抑制神经生成。并且高浓度的雌激素会抑制斑马鱼血管生成，抑制Vegf通路的Vegfa及其受体的表达。
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