摘要
内分泌治疗是国际公认的雌激素阳性(ER+)乳腺癌的重要治疗手段。然而，雌激素受体阳性乳腺癌患者面临的最大挑战则是其对临床内分泌治疗—尤其是他莫昔芬药物治疗耐药的问题。本研究发现，在ERα阳性的乳腺癌患者的肿瘤相关成纤维细胞CAFs中GPR30的高表达与他莫昔芬治疗耐药存在一定的相关性。因此，为了进一步研究CAFs中GPR30的表达情况是否与肿瘤细胞对TAM药物治疗的响应有关以及其作用的具体机制，后续应用了mRNA微阵列分析在来自原发性乳腺癌的永生化的CAFs中，通过加入G1和G15干预CAFs中的GPR30，找到与GPR30相关的下游靶基因。实验结果证实被激活的GPR30可以促进肿瘤相关成纤维细胞中HMGB1的基因的表达及外分泌增加。再者，我们继续加入GPR30的抑制剂G15进行干预，发现HMGB1的外分泌和表达量会随着G15的加入呈现显著下降的趋势，且以上的结果通过使用抑制剂LY294002，有效抑制PI3K/AKT通路后，也能模拟实现。此外，还证实了GPR30诱导的上调HMGB1可以触发MEK/ERK信号通路，导致肿瘤细胞自噬活动增加，从而保护肿瘤细胞免受因他莫昔芬药物暴露而引起的细胞凋亡。并且，通过加入重组蛋白rHMGB1干预肿瘤细胞后也可以直接重复上述效应。为了进一步探索自噬在耐药中是否发挥作用，我们加入U0126干扰MEK/ERK信号通路，结果证实U0126的加入中断了由HMGB1所诱导的肿瘤细胞的保护性自噬活动，肿瘤细胞再次启动凋亡程序；且在药物治疗时，肿瘤细胞表现出对于药物TAM的敏感性增加。上述所有数据都提示在他莫昔芬的暴露下，癌细胞相关成纤维细胞中激活的GPR30可以上调HMGB1外分泌及其表达，诱导癌细胞保护性自噬增加，从而干扰了他莫昔芬内分泌治疗的疗效。 通过实验数据还揭示了肿瘤相关成纤维细胞可以通过激活GPR30/PI3K/AKT信号通路诱导HMGB1分泌和表达；并且，外分泌的HMGB1可以通过ERK依赖的方式诱导肿瘤细胞自噬，并在TAM暴露后表现出对内分泌治疗的抗性增加。因此，我们认为靶向GPR30及下游级联可能是一种有效的削弱ERα阳性乳腺肿瘤对内分泌治疗的耐药性的可治策略。
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