摘要
长链非编码RNA(long non-coding RNA，LncRNA)是一种长度超过200nt的RNA，不编码基因，却可通过多种方式在癌症的诊断、治疗及预后等方面起到重要作用。LncRNA MALAT1被发现在多种肿瘤中存在差异表达，然而其在肠道恶性肿瘤中的研究甚少，有待进一步探究。 目的： 探讨LncRNA MALAT1在结肠癌中的表达情况，观察其对SW620细胞增殖、迁移的影响，并初步探究LncRNA MALAT1下游的潜在转导分子，阐明LncRNAMALAT1在结肠癌发生发展中的作用。 方法： 本研究通过对大连大学附属中山医院行结肠癌根治术患者的手术标本进行标准化收集，共纳入了40例患者术后肿瘤组织标本及其配对的癌旁组织标本，运用RT-PCR技术检测40例结肠癌患者的癌组织及配对癌旁组织中LncRNA MALAT1的表达水平，比较癌及癌旁组织中LncRNA MALAT1的表达情况；采用免疫组织化学染色方法，直接观察组织中目的蛋白p-PI3K、p-Akt的表达情况；通过Western blot实验，定量分析癌及癌旁组织中p-PI3K、p-Akt的表达水平；并进一步分析目的蛋白与目的基因的相关性；再通过si-MALAT1下调SW620细胞中LncRNA MALAT1的表达水平，采用Western blot实验检测细胞中p-PI3K、p-Akt蛋白表达情况；最后运用CCK-8实验、Transwell迁移实验及集落形成实验检测SW620细胞增殖活性、迁移能力及集落形成能力。 结果： 组织学实验：RT-PCR的结果显示，LncRNA MALAT1在结肠癌组织中表达增加，较癌旁组织中明显增高，差异具有统计学意义（p＜0.05），提示LncRNAMALAT1在结肠癌组织中高表达；免疫组织化学染色结果提示结肠癌组织中目的蛋白p-PI3K、p-Akt的表达较癌旁组织明显增多（χ2=18.15，p＜0.05，χ2=20.46，p＜0.05）；Western blot实验结果提示结肠癌组织中目的蛋白p-PI3K、p-Akt的表达较癌旁组织明显增多（p＜0.05）；应用卡方检验行统计学分析，提示LncRNA MALAT1与p-PI3K、p-Akt存在相关性（χ2=13.41，p=0.0002；χ2=6.857，p=0.0088）。细胞学实验：下调结肠癌细胞中LncRNA MALAT1的表达，p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平也随之降低（P＜0.05）；CCK-8实验显示si-MALAT1组细胞增殖能力较si-NC组降低（P﹤0.05）；Transwell实验显示si-MALAT1组细胞迁移能力较si-NC组减弱（P﹤0.05）；集落实验显示si-MALAT1组细胞集落形成能力下降（si-MALAT1：14.9%，si-NC：27.2%，P﹤0.05）。 结论： 1、LncRNA MALAT1在结肠癌中高表达，促进肿瘤细胞的增殖、迁移； 2、LncRNA MALAT1与PI3K/Akt信号通路上关键蛋白的表达水平存在正向相关性。
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