摘要
硫酸庆大霉素滴眼液为氨基糖苷类抗生素，主要用于治疗结膜炎、角膜炎与泪囊炎等疾病。庆大霉素由发酵制得，除C1，C1a，C2，C2四个主成分外，还有小诺霉素、西索米星等多个结构相似的微量物质，它们的活性和毒性各不相同，因此有必要对庆大霉素C组分和有关物质进行检测。滴眼剂中抑菌剂的过量添加对眼睛有损害，存在安全风险。而中国药典(2020年版)收载的硫酸庆大霉素滴眼液的质量标准仅有性状、鉴别、检查(pH、颜色和渗透压摩尔浓度)与含量测定，未进行庆大霉素C组分、有关物质和抑菌剂等的检测。鉴于此，为保障硫酸庆大霉素滴眼液的有效性、安全性与质量标准可控性，本文对硫酸庆大霉素滴眼液的质量控制开展了以下几方面的探索性研究: (1)HPLC-ELSD法测定滴眼液中庆大霉素C组分的研究 采用YMC-Triart C18ExRS色谱柱(4.6×250mm，5μm)，以0.2mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(96:4)为流动相，流速0.6mL/min，蒸发光散射检测器(漂移管温度110℃，载气流量2.5L/rain，增益为1);柱温35℃;进样量20此，建立HPLC-ELSD法测定硫酸庆大霉素滴眼液中的庆大霉素C组分并进行方法学验证。结果:庆大霉素C组分(C1、C1a、C2、C2a)的回收率分别为99.2％、99.4％、99.6％、99.1％(n=9)，分别在68.4～855.0、65.4～817.4、72.7～908.8、44.3～553.9gg/mL范围内呈良好线性关系，定量限分别为13.7、6.5、9.4、8.9μg/mL，方法专属性和精密度均较好。供试品中C1为标示量的19.0％～23.4％，C2a+C2为标示量的23.5％～32.9％，C2a+C2为标示量的45.5％-50.2％，总组分为标示量的91％～101％。 (2)硫酸庆大霉素滴眼液中有关物质的检查 采用HPLC-ELSD法，色谱条件与庆大霉素C组分相同。结果:西索米星、小诺霉素的回收率为100.6％、97.7％(n=9)，二者分别在5.0～99.7、5.1～101.7μg/mL范围内线性关系良好，检测限分别为2.2、4.1μg/mL，方法准确、线性范围宽，可满足有关物质检查的要求。供试品含西索米星、小诺霉素、其他单个杂质、其他总杂质分别为标示量的0.2％～1.5％、1.3％-2.5％、0.6％～1.5％和2.3％～4.0％。 (3)抑菌剂的检查 建立HPLC-UV新方法测定了5种抑菌剂。色谱柱为Waters XBridge C18(4.6×150mm，5gm);流动相A为1％三乙胺溶液(用磷酸调pH值至3.0)，流动相B为甲醇，梯度洗脱程序(0～5min，A:65％，B:35％;5～22min，A:65％→10％，B:35％→90％;22～27min，A:10％，B:90％:27～28min，A:10％→65％，B:90％→35％;28～40min，A:65％，B:35％);流速1.0mL/mim检测波长214nm;柱温30℃;进样量20此。结果:羟苯甲酯、羟苯乙酯、羟苯丙酯、硫柳汞钠、苯扎氯铵的回收率分别为100.5％、101.9％、101.7％、102.3％、97.8％(n=9)，检测限分别为0.5、0.5、0.5、1.2、0.6p,g/mL。国内两家企业检品中羟苯乙酯的含量为标示量的88.70～97.0％。 综上所述，本文新建方法简便准确，专属性强，可作为现行硫酸庆大霉素滴眼液质量标准的有效补充和提高改进，为硫酸庆大霉素滴眼液质量标准的完善提供理论和实验依据。
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