摘要
溃疡性结肠炎是一种慢性复发性疾病，通常表现为食欲减退、体重下降、腹痛、腹泻、大便带血等。发病机制尚不明确，可能与遗传因素、肠道上皮屏障破坏、免疫反应失调和肠道微生物失衡等许多因素有关。目前，治疗溃疡性结肠炎的药物包括氨基水杨酸类、糖皮质激素类、皮质类固醇和免疫抑制剂等，这些药物往往只能缓解症状而不能根除，还可能存在明显副作用，因此，治疗溃疡性结肠炎药物研究是现在的研究热点。 现代研究表明，中药连翘和一些含连翘的复方中药具有治疗溃疡性结肠炎的功效。连翘苷是连翘的主要活性成分，其在体内可转化为连翘脂素而发挥作用，研究发现连翘脂素具有较强的抗炎、抗氧化、保肝等活性。因此，基于连翘脂素的抗炎活性，本课题体外探究了连翘脂素与人肠道菌群的相互作用；体内研究了连翘脂素对DSS诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠的治疗作用；此外，还研究了急性溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群对连翘脂素的代谢。具体研究内容如下： （1）连翘脂素含量检测：利用高效液相色谱分析技术，基于肠道菌群基质，建立了连翘脂素含量测定方法。结果表明方法专属性强，无基质效应影响，方法重复性好等，可以用来检测连翘脂素含量。 （2）连翘脂素与人肠道菌群相互作用：运用高效液相和液质联用技术分析检测人肠道菌群对连翘脂素的代谢作用；评价代谢产物的抗炎和抗氧化活性。结果表明人肠道菌群与连翘脂素体外厌氧孵育主要产生4种连翘脂素代谢产物，并且代谢产物也具有良好的抗炎和抗氧化活性。利用16SrRNA高通量测序分析连翘脂素对人肠道菌群组成的影响，结果发现连翘脂素及其代谢产物可以显著富集对保护溃疡性结肠炎有益的菌和产丁酸的菌。基于上述研究结果，可推测连翘脂素具有改善溃疡性结肠炎症状的效果。 （3）连翘脂素对DSS诱导的急性溃疡性结肠炎小鼠保护作用：实验通过BALB/c小鼠自由饮用3%DSS诱导急性溃疡性结肠炎，灌胃低、中、高剂量（50、100、200mg/kg）的连翘脂素治疗。结果表明连翘脂素能显著改善小鼠体重下降、腹泻便血情况；下调疾病活动指数及结肠组织学评分；降低结肠TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10、MPO和MDA含量，提高结肠SOD活性。说明连翘脂素对急性溃疡性结肠炎小鼠有保护作用。 （4）小鼠排泄粪便中连翘脂素的含量：利用高效液相分析技术检测到小鼠粪便中含有连翘脂素，其24h内含量变化呈现先上升后下降的趋势。说明除了部分连翘脂素在小肠被吸收利用外，还有部分可以到达小鼠结肠部位。 （5）急性溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群对连翘脂素的代谢：采用体外厌氧培养法，利用高效液相和液质联用技术分析正常小鼠肠道菌群和急性溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群对连翘脂素的代谢。结果显示急性溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群对连翘脂素的代谢速率减慢。连翘脂素代谢产物与正常小鼠、人肠道菌群代谢连翘脂素的产物基本相同，并且代谢产物同样具有良好的抗炎和抗氧化活性。
NETL