摘要
目的：变应性鼻炎(allergicthinitis，AR)是一种常见的变应性疾病。研究发现最初在神经系统中作为神经导向因子被发现的Semaphorin家族蛋白也可通过发挥免疫调节作用参与多种炎症性疾病的发病过程。早前的一篇文献显示，Semaphorin家族蛋白之一的Sema3A可通过抑制鼻黏膜中神经纤维的生长减轻AR小鼠模型的挠鼻、喷嚏等过敏症状。提示Sema3A参与了AR的发病，但Sema3A是否通过发挥免疫调节作用参与AR的发病过程及其具体机制尚不清楚，其在AR中的确切作用机制有待深入研究。本研究旨在观察Sema3A在AR中的表达并探究其在AR异常免疫调节及神经内分泌调节中的作用及机制。 方法： 1．收集AR患者和健康对照者外周血和鼻黏膜组织，分别采用ELISA法和免疫荧光法检测血清中鼻黏膜组织中Sema3A的表达情况；构建AR小鼠模型，应用ELISA法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)和免疫荧光法检测小鼠血清和鼻黏膜组织中Sema3A的表达情况。 2．采用ELISA法检测小鼠血清中OVA特异性IgE和IL-4、IFN-γ的表达水平，流式细胞技术检测脾脏组织中Th1、Th2、Th17、Treg和Breg细胞比例并对鼻黏膜组织进行HE和PAS染色观察小鼠鼻黏膜组织学改变。 3．构建Sema3A滴鼻的AR小鼠模型，采用ELISA法检测小鼠血清、鼻黏膜和脾细胞培养上清中OVA特异性IgE、IL-4、IFN-γ、IL-10和IL-17的表达水平。应用流式细胞技术检测脾脏和颈部淋巴结中Th1、Th2、Th17、Treg和Breg细胞比例。 4．构建Sema3A滴鼻的AR小鼠模型，检测小鼠鼻黏膜组织中神经肽和IL-4及IFN-γ的表达情况并做相关性分析。 结果： 1．AR患者和小鼠模型血清和鼻黏膜组织中Sema3A表达均明显低于对照组；AR小鼠血清中OVA特异性IgE和IL-4浓度明显高于正常对照组，IFN-γ，浓度则低于对照组。 2．与正常对照组相比，AR小鼠脾脏中Th2和Th17细胞比例明显升高，而Th1、Treg和Breg细胞比例明显降低；AR小鼠鼻黏膜组织中有嗜酸性粒细胞和杯状细胞数目明显增多；给与Sema3A滴鼻后AR小鼠血清、鼻腔灌洗液和脾细胞培养上清中OVA特异性IgE浓度、IL-4及IL-17浓度明显少于单纯AR组，脾脏和颈部淋巴结组织中Th2和Th17细胞比例明显降低，而Th1、Treg和Breg细胞比例明显升高。 3．与正常对照组小鼠相比，AR组小鼠鼻黏膜组织中NKA、VIP、NPY及IL-4的表达水平明显升高，而IFN-γ的表达明显降低；与单纯AR组相比，Sema3A滴鼻组小鼠鼻黏膜组织中NKA、VIP及IL-4的表达明显降低，而IFN-γ的表达明则显著升高；同时，NKA、VIP的表达与IL-4的表达呈正相关而与IFN-γ的表达呈负相关。NPY在AR组和Sema3A滴鼻组间无明显差异，Nociceptin在正常对照组、AR组、Sema3A滴鼻组及Saline滴鼻组四组间均无明显差异。 结论： 1．Sema3A在AR中呈明显低表达。 2．Sema3A可通过调节Th/Th2和Th17/Treg失衡抑制AR的炎症反应。 3．Breg细胞数目减少与AR的发生相关，Sema3A可通过促进Breg细胞的表达抑制AR的变应性炎症反应。 4．Sema3A还可能通过调节神经内分泌免疫网络参与调节AR的病理过程。
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