摘要
日本脑炎病毒(Japaneseencephalitisvims，JEV)是黄病毒科黄病毒属的一种虫媒病毒。它是亚洲许多国家病毒性脑炎的主要病因，目前还没有针对JEV特定抗病毒药物出现。JEV由3种结构蛋白与7种非结构蛋白组成，其中衣壳蛋白c是JEV颗粒的核心蛋白，它是病毒核衣壳组装所需的结构元件，具有保护病毒基因组的经典功能。 2019年日本脑炎病毒衣壳(Japaneseencephalitisvimscapsid，JEVC)蛋白的结构己被X射线晶体学所解析，在晶体结构中没有观察到无序的N端。有报道称衣壳N端单点突变(N15K)能够扩大病毒粒子，稳定载体，这可能影响其组装，然而其N端的结构基础仍未可见。本论文利用NMR对JEVC蛋白的溶液结构进行了研究。首先利用远紫外圆二色谱与分析超速离心测定了JEVC蛋白在溶液中的二级结构及其寡聚态，显示JEVC蛋白在溶液中存在着仅螺旋，其寡聚态为二聚体。之后再对JEVC蛋白进行2H/13C/15N三标记，采集了常规的三共振谱图进行其主链归属，在信号归属的基础上利用TALOS+对JEVC蛋白的二级结构进行了预测，表明JEVC蛋白在溶液中的二级结构与晶体结构类似。同时还测量了JEVC蛋白主链15N的纵向弛豫(T1)和横向弛豫时间(T2)，进一步验证了JEVC蛋白在溶液中的寡聚态。该研究为后期用NMR方法获取JEVC蛋白的动力学信息奠定了基础，同时也为进一步研究病毒组装及其与宿主蛋白相互作用的机制奠定了基础。 据研究显示，JEVC蛋白能够与微管相关蛋白1轻链3(MAP1LC3，简称LC3)的非脂化形式LC3-I发生相互作用。在主链归属的基础上利用NMR探究了JEVC蛋白与LC3-I在稀溶液中的相互作用。表明了二者在稀溶液中的相互作用较弱。这为后面在膜调控的环境或类细胞环境下研究其相互作用奠定基础，同时也为研究JEV的感染提供了新的思路。
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