摘要
目的： 糖尿病慢性皮肤溃疡是糖尿病最难治的并发症之一，鲜有药物可以有效治愈糖尿病创口。单瓣朱槿花（Hibiscus rosa-sinensis L.，HRS）是锦葵科木槿属植物中的一种开花植物，是民间用于治疗皮肤疮痈和溃疡的道地草药。早期研究结果表明，其对皮肤疮痈和溃疡具有抗炎和抗菌双重作用。因此，本研究基于前期工作，拟建立糖尿病性皮肤创面模型、用改良后的HRS凝胶制剂观察HRS凝胶制剂对糖尿病大鼠皮肤溃疡愈合的疗效。 方法： 1.采用腹腔糖耐量试验检测高脂喂养30天后的大鼠糖耐量情况。 2.用链脲佐菌素（25、40和55mg/kg）诱发糖尿病，监测血糖、体重，以筛选最合适的剂量。 3.采用高脂喂养联合腹腔注射链脲佐菌素的方式诱导Ⅱ型糖尿病大鼠模型。 4.建立糖尿病大鼠背部和足部全层皮肤切除模型，用低中高三个剂量的单瓣朱槿花正丁醇萃取物（N-butyl alcohol extract of HRS,NHRS）凝胶、贝复新和空白凝胶治疗，观察皮肤愈合情况并测量未愈合创口面积，计算愈合率。 5.收集术后15天的皮肤标本，进行HE染色，马松染色，免疫组织化学染色试验，检测M1型巨噬细胞标记物诱导性一氧化氮合酶（inducible Nitric Oxide synthase,iNOS）、M2型巨噬细胞标记物CD206蛋白表达。 6.硅胶柱色谱法分离纯化NHRS。利用全层皮肤缺损溃疡模型评价NHRS分离产物对正常大鼠皮肤溃疡的疗效。 结果： 1.与正常组相比，高脂喂养30天的大鼠出现糖耐量异常，糖耐量显著降低（P＜0.05）。 2.≥25mg/kg剂量的链脲佐菌素可以诱导形成稳定的糖尿病大鼠模型。 3.高脂饮食30天联合25mg/kg链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠足部和背部伤口的愈合速度比正常大鼠慢（P＜0.05）。 4.低中高三个剂量的NHRS凝胶和阳性药物贝复新均可加速糖尿病大鼠足部和背部伤口的愈合（P＜0.05）。 5.病理学和免疫组化分析结果显示，NHRS能促进皮肤上皮细胞再生、胶原纤维形成，促进巨噬细胞由M1型到M2型转换，加快糖尿病皮肤溃疡愈合。 6.成功分离得到NHRS正丁醇洗脱部分和乙醇-甲酸洗脱部分。实验结果显示乙醇-甲酸洗脱部分在促进普通伤口愈合方面优于其他部分。 结论： 1.采用高脂饮食30天联合25mg/kg链脲佐菌素可成功诱导稳定的SD大鼠Ⅱ型糖尿病模型，该模型可用于糖尿病皮肤溃疡研究。 2.NHRS可增加促进上皮再生、胶原纤维形成、巨噬细胞M1/M2型转换，促进糖尿病皮肤溃疡愈合。 3.NHRS乙醇-甲酸洗脱部分可能是NHRS促进糖尿病皮肤溃疡愈合的有效成分。
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