摘要
草鱼(Ctenopharyngodonidellus)是中国四大家鱼之一，也是我国主要的淡水养殖经济鱼类。柱状黄杆菌(Flavobacteriumcloumnare)感染能够导致草鱼患“烂鳃病”，该病危害性高、传染力强，严重威胁草鱼养殖业的发展。本论文探讨了组蛋白H2A酿酒酵母制剂以及养殖水体盐度变化对草鱼免疫功能的影响，主要研究内容和研究结果如下: 以草鱼组蛋白gcH2A-4和gcH2A-11为研究对象，成功构建重组质粒gcH2A-4-PYD1和gcH2A-11-PYD1，并将其展示在酵母菌株EBY100表面。以草鱼作为研究模型，不同时间两次腹腔注射重组酿酒酵母制剂gcH2A-4-PYD1/EBY100和gcH2A-11-PYD1/EBY100。在第一次注射免疫7天后取草鱼的脾脏和肠组织进行转录组测序，结果发现与对照组相比，实验组gcH2A-4-PYD1/EBY100以及gcH2A-11-PYD1/EBY00均能够上调与免疫相关的信号通路。柱状黄杆菌浸泡感染实验结果发现对照组PYD1/EBY100草鱼的死亡率高达93.3％，而gcH2A-4-PYD1/EBY100和gcH2A-11-PYD1/EBY100的死亡率分别为70％、66.7％。因此重组酵母制剂gcH2A-4-PYD1/EBY100及gcH2A-11-PYD1/EBY100能够刺激草鱼产生免疫应答，抵抗柱状黄杆菌侵染。本论文首次构建了草鱼组蛋白H2A重组酿酒酵母制剂，并且评估该酵母制剂的保护效果，为草鱼烂鳃病的预防奠定理论基础。 选择浓度为3‰和6‰的盐度处理草鱼，结果显示在盐度处理25天后草鱼开始发生病变，其中3‰盐度处理有症状组的损伤最为严重，并且随着时间延长发病率逐渐升高。鳃组织病理切片也表明与对照组相比，3‰盐度处理有症状组的组织明显受到影响，鳃丝严重脱落;而6‰盐度处理有症状组只是轻微的脱落。在盐度胁迫30天后，通过柱状黄杆菌感染实验统计草鱼存活情况，结果显示相比于对照组，3‰盐度处理组的存活率显著低于6‰盐度处理组。柱状黄杆菌平板计数实验也表明3‰盐度处理组的细菌数量显著高于6‰盐度处理组。感染两天后相比于对照组，3‰并116‰盐度处理组中免疫球蛋白IgD、IgT以及IgM的蛋白表达量均降低。此外在盐度处理未感染和感染的情况下，鳃组织转录组数据显示NLR受体信号通路均被显著富集。因此盐度处理会危害草鱼的健康，影响免疫反应，增强草鱼对柱状黄杆菌的敏感性。本论文通过研究养殖水体盐度变化对草鱼免疫功能的影响，这对于滩涂养殖水体的再利用具有一定意义。
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