摘要
泰妙菌素是一种截短侧耳素类动物专用抗生素,主要用于防治畜禽呼吸系统疾病。该药在动物体内分布广,吸收好,抗菌活性强,对支原体、细菌及螺旋体都具有良好的抗菌活性,因此在畜禽养殖中被广泛应用。我国批准兽医临床上使用的制剂主要有延胡索酸泰妙菌素可溶性粉和延胡索酸泰妙菌素预混剂。其中,延胡索酸泰妙菌素预混剂被批准用于猪和鸡,但目前我国尚未规定鸡的临床休药期,国内关于延胡索酸泰妙菌素预混剂在鸡体内残留规律的研究也尚属空白。由于延胡索酸泰妙菌素预混剂在鸡养殖生产中应用前景十分广阔,研究其在鸡体内残留消除规律,制定科学的休药期,指导临床合理用药是非常必要的。因此本文开展了以下几项研究: 1.建立鸡组织中泰妙菌素残留标志物(8-α-羟基妙林)测定的液相色谱-串联质谱方法 用丙酮-盐酸混合溶液提取组织中的泰妙菌素残留,将其碱水解为8-α-羟基妙林,经乙酸乙酯萃取,供液相色谱-串联质谱测定,基质添加标准溶液校正,以外标法定量。结果显示:8-α-羟基妙林在25μg/kg~5000μg/kg范围内,线性关系良好,相关系数大于0.99;本方法肌肉和皮+脂组织的检测限为25?g/kg,定量限为50?g/kg;肝脏组织的检测限为50?g/kg,定量限为100?g/kg;8-α-羟基妙林在肌肉和皮+脂中50μg/kg~200μg/kg、鸡肝中100μg/kg~2000μg/kg添加浓度范围内,平均回收率范围为82.1%~105.7%,相对标准偏差范围为0.6%~9.5%。本方法快速简便、专属性强、灵敏度高,符合兽药残留检测相关规定,可满足鸡组织中泰妙菌素标志物(8-α-羟基妙林)残留检测的要求,并可在市场样品检测中应用本方法。 2.用所建立的8-α-羟基妙林残留检测方法,开展延胡索酸泰妙菌素预混剂在鸡体内残留消除试验,并制定休药期 按照《兽药残留消除试验指导原则》,选取体重约1kg的健康白羽肉鸡110只,按照每1T饲料,鸡500g(以延胡索酸泰妙菌素计)进行混饲给药,连续5天,停药后4h、第1d、第2d、第3d、第5d、第7d分别随机放血宰杀15只鸡,取肌肉、肝脏、皮+脂肪三种组织,利用本研究建立的泰妙菌素残留标志物8-α-羟基妙林测定方法测定含量。结果显示,肝脏组织中的8-α-羟基妙林残留量显著高于肌肉组织和皮+脂,在停药第4h,肝脏内残留量达到最高(3424.8±73.3?g/kg),随后开始下降,在第2d残留量降至最大残留限量以下,第7d未检出;泰妙菌素在肌肉和皮+脂组织中消除迅速,第2d肌肉和皮+脂中均未检出8-α-羟基妙林。运用WT1.4计算出延胡索酸泰妙菌素预混剂在肝脏、肌肉、皮+脂中的休药期分别为2.45d、2d、2d。建议按照延胡索酸泰妙菌素预混剂推荐剂量使用时,鸡的临床休药期为3d。 3.用所建立的8-α-羟基妙林残留检测方法,对河南市场上鸡肉、鸡肝中泰妙菌素残留现状进行评估 利用本研究建立的泰妙菌素残留标志物8-α-羟基妙林测定方法,对从河南省九地市抽取的295批鸡肉、鸡肝样品进行检测。结果显示,295份样品中共检出8-α-羟基妙林残留阳性样本5份,总检出率1.7%。不同类别样品检出率为:鸡肝(2.9%)>鸡肉(1.3%);不同环节检出率为:农贸市场(2.3%)>屠宰场(1.5%)>超市(1.3%)。阳性样品残留量为:鸡肉56.8~63.2μg/kg;鸡肝128.3~176.5μg/kg,均低于国家规定的最大残留限量。表明河南省市售鸡肉、鸡肝中泰妙菌素残留标志物8-α-羟基妙林安全风险低,同时也证明所建立的检测方法能够满足实际样品检测需求。