摘要
西洋参是五加科人参属草本植物,多年来,研究学者们对中国传统中药材西洋参根部的研究和开发利用甚多,但对西洋参地上即非药用部位部分的西洋参茎叶研究还相对较少,从而造成西洋参茎叶资源的浪费。动物养殖业逐年向前发展,动物也越来越依赖饲料,饲料中通常会添加抗生素,这些抗生素不仅会对动物产生不利影响也严重危害着人体健康。中草药是一种极具发展空间的饲料添加剂,具有绿色、天然、毒副作用小等特点,且能降低动物的患病率。西洋参茎叶作为一种中草药资源,含有丰富的多糖、皂苷等多种天然成分,可考虑将其作为中草药饲料添加剂进行开发和利用。本研究通过体外试验和动物饲养试验,探讨西洋参茎叶提取物的抗菌消炎作用及其对鹌鹑生产性能的影响,为西洋参茎叶作为中草药饲料添加剂进一步开发和利用提供理论依据。研究如下: 1.西洋参茎叶不同提取部位提取工艺的优化:以葡萄糖含量为评价指标确定西洋参茎叶最佳水提提取工艺为料液比1∶35、温度90℃、时间2h;以人参皂苷Re含量为评价指标确定西洋参茎叶最佳醇提提取工艺为甲醇浓度60%、料液比1∶40、温度80℃、时间2h。 2.西洋参茎叶不同提取部位对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7细胞的影响:大肠杆菌侵染细胞构建细胞凋亡模型、LPS构建细胞炎症模型,通过Hoechst染色观察细胞凋亡情况和细胞形态;通过ELISA法测定细胞分泌TNF-α、IL-1β和IL-6细胞炎症因子浓度;通过荧光定量PCR法测定细胞炎症因子mRNA基因表达量。试验结果发现,西洋参茎叶水提取部位和醇提取部位对大肠杆菌诱导的细胞凋亡和LPS诱导的细胞炎症均具有一定的抑制效果,可降低细胞释放TNF-α、IL-1β和IL-6细胞炎症因子浓度及其mRNA基因表达量,且当西洋参茎叶水提取部位和醇提取部位浓度为0.25mg/mL时效果最好。 3.西洋参茎叶不同提取部位对鹌鹑生长性能的影响:试验分组为:基础日粮(空白对照组)、基础日粮添加抗菌药物(抗生素组)、基础日粮添加2%西洋参茎叶超微粉(CWF组)、基础日粮添加1%西洋参茎叶水提物(SD组)、基础日粮添加1.5%西洋参茎叶水提物组(SZ组)、基础日粮添加2%西洋参茎叶水提物(SG组)、基础日粮添加1%西洋参茎叶醇提物(CD组)、基础日粮添加1.5%西洋参茎叶醇提物组(CZ组)、基础日粮添加2%西洋参茎叶醇提物(CG组)、基础日粮添加1%西洋参茎叶水提醇提混合物(HD组)、基础日粮添加1.5%西洋参茎叶水提醇提混合物(HZ组)、基础日粮添加2%西洋参茎叶水提醇提混合物(HG组)。饲养试验结束后,将各组鹌鹑进行颈静脉采血,收集血清,采血后的鹌鹑致死,取脑组织、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、法氏囊、十二指肠、盲肠食糜。通过ELISA法测定鹌鹑血液生化指标,荧光定量PCR法测定鹌鹑生长激素(GH)基因mRNA的表达情况,组织切片法测定鹌鹑肝脏、肾脏结构变化,高通量测序法测定鹌鹑肠道微生物菌群的变化,试验结果发现,在鹌鹑基础日粮中添加西洋参茎叶可以提高鹌鹑平均日增重同时降低料肉比;提高免疫器官指数;维持血糖正常范围和谷丙转氨酶正常范围并提高总抗氧化能力;提高生长激素(GH)mRNA基因表达量;改善蛋品质和肉品质,增加蛋和肉中蛋白质、脂肪含量,提高鹌鹑肉中脂肪酸含量及鲜味氨基酸含量;对肝脏、肾脏结构无不良影响,同时可增加肠道微生物菌群丰富度和多样性。 本试验通过对西洋参茎叶提取工艺的优化,制备最佳提取工艺下不同提取部位提取物,通过体外细胞试验验证西洋参茎叶体外免疫活性和体内试验探究其对鹌鹑生产性能的影响,为西洋参茎叶作为中草药饲料添加剂的开发和利用提供了理论基础。