摘要
目的： 明确钙网蛋白（Calreticulin，CALR/CALR）在鼻咽癌（NPC）发生发展中的作用，阐明CALR通过激活STAT3信号通路促进鼻咽癌细胞恶性进展的分子机制，为鼻咽癌的诊治提供分子靶标。 方法： 1、收集鼻咽癌组织蜡块和新鲜临床样本，采用免疫组化、qRT-PCR、检测CALR在鼻咽癌组织及中的表达，并分析CALR表达与鼻咽癌各临床病理特征和预后的关系，考察CALR在鼻咽癌组织中的临床意义。采用Westernblot等方法检测CALR在鼻咽癌细胞系及永生化的正常鼻咽上皮细胞中的表达，检测CALR在鼻咽癌细胞中的表达情况。 2、采用CCK-8、细胞划痕、Transwell迁移和侵袭实验以及Real-timePCR、Westernblot等方法、检测CALR表达对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭等生物学行为，以及STAT3信号通路相关分子表达的影响，考察CALR影响鼻咽癌细胞恶性进展的作用和分子机制。 结果： 1、CALR蛋白在NPC组织中显著高表达；鼻咽癌组织中CALR mRNA水平的表达也显著升高（Plt;0.001）；与永生化的正常鼻咽上皮NP69细胞相比，CALR蛋白表达在NPC细胞系（CNE1、CNE2、HONE1、C666-1、HNE1、HNE2和5-8F）中均有不同程度的升高。 2、CALR高表达与鼻咽癌临床分期（P=0.003）和转移（P=0.023）正相关；CALR高表达NPC患者的Progression-free survival（PFS）（P=0.013）和OverallsurvivalOS（P=0.003）较短；CALR高表达是鼻咽癌患者不良预后的独立预测因素。 3、与空白对照组相比，CNE2和HONE1细胞沉默CALR表达后，其增殖能力显著减弱；与空白对照组相比，CALR表达沉默的CNE2和HONE1细胞伤口愈合明显减慢；CNE2和HONE1细胞沉默CALR表达后，其迁移能力显著减弱；沉默CALR表达后，CNE2和HONE1细胞的侵袭能力也显著减弱。 4、与空白对照组相比，CNE2和HONE1细胞敲减CALR表达后，细胞内STAT3总蛋白、p-STAT3蛋白表达均明显降低。 结论： 1、CALR在鼻咽癌中高表达，可促进鼻咽癌细胞恶性进展，其机制与激活STAT3信号通路有关。 2、CALR可能是鼻咽癌进展和预后监测的潜在分子标志。
NETL