摘要
目的 本实验拟通过建立SD大鼠根尖周炎动物模型，研究Shh信号通路分子在根尖周炎发生发展过程中的表达与变化，以及其与炎症因子TNF-α、IL-1β及破骨细胞的关系。 方法 30只SD大鼠随机分为0、7、14、21、28天组，每组6只。0d为对照组不进行开髓处理，于0d收集双侧下颌骨标本。实验组大鼠全麻后将双侧下颌第一磨牙开髓，暴露于口腔环境中，分别于术后7、14、21、28d收集双侧下颌骨标本。X线片观察根尖暗影变化情况，常规HE染色进行根尖区组织学观察，免疫组织化学染色检测Shh、Ptc、Smo、Gli1、TNF-α及IL-1β蛋白的表达情况，酶组织化学观察破骨细胞在根尖周病变中的数量变化。 结果 1.X线片显示大鼠下颌第一磨牙根尖区在7d组出现低密度影像，从7d组至28d组根尖区低密度影的面积逐渐增大。 2.HE染色发现在7d组根尖周出现少量炎症细胞浸润及牙槽骨轻度吸收，7d组至28d组牙槽骨吸收范围逐渐增大，炎症细胞浸润量在14d组达到高峰，21d组至28d组呈下降趋势。 3.酶组织化学染色显示在正常根尖周组织中，根尖区未观察到破骨细胞;开髓后随着时间的延长，破骨细胞数量逐渐增多，其细胞计数在14d组达到高峰;2ld组破骨细胞数量下降，28d组仅可见少量破骨细胞。统计学结果显示组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示除7d组和28d组之间的差异没有统计学意义外(P＞0.05)，其余各组之间均有统计学差异(P＜0.05)。 4.免疫组织化学染色结果显示，Shh、Ptch、Smo、Glil、TNF-α、IL-1β在0d组的根尖周组织中弱表达。Shh的表达水平在7d组达到峰值，14d组到28d组呈下降趋势，统计学结果显示组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示除14d组和21d组无统计学差异外(P＞0.05)，其余各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05)。Ptch的表达水平在14d组达到峰值，在21d组到28d组呈下降趋势，统计学结果显示，组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05)。Smo和Gli1的表达水平在14d组达到峰值，21d组到28d组持续降低，统计学结果显示组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示除7d组和21d组、14d组和21d组的表达水平无统计学差异外(P＞0.05)，其余各组之间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。 TNF-α的表达水平在14d组达到峰值，21d组到28d组呈下降趋势，统计学结果显示组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示TNF-α的表达水平在各组之间均有统计学差异(P＜0.05)。IL-1β的表达水平在14d组达到峰值，从21d组到28d组持续降低，统计学结果显示组间总体差异有统计学意义(P＜0.05)，组间两两比较结果显示除7d组和28d组、14d组和21d组无统计学差异外(P＞0.05)，其余各组之间的差异均有统计学意义(P＜0.05)。 5.Pearson相关分析示Shh、Ptc、Smo、Glil的表达水平呈正相关关系(P＜0.05)，Shh、Ptc、Smo、Glil的表达水平分别与TNF-α、IL-1β的表达水平呈正相关关系(P＜0.05)，Ptc、Smo、Gli1、TNF-α、IL-1β的表达水平分别与破骨细胞的数量变化呈正相关关系(P＜0.05)。 结论 1.Shh信号通路分子在根尖周炎发展的不同时间段组织中的表达变化，提示该信号通路可能参与根尖周炎病变的发生发展过程。 2.Shh信号通路分子与根尖周炎的炎症因子的表达呈正相关关系，表明Shh信号通路可能参与了根尖周炎的炎症反应，有望作为评价根尖周炎炎症进展的生物标记物。 3.Shh信号通路分子的表达与破骨细胞的数量变化呈正相关关系，表明该信号通路可能在根尖周炎的骨吸收过程中发挥作用。
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