摘要
研究目的：利用水溶性维纶纺织线为模板，探索通过牺牲模板法制备聚己内酯/几丁糖多通道神经导管的方法，并通过交联接枝技术向导管负载神经营养因子-3（NT-3），探索制备NT-3缓释型神经导管的可行性，最终通过动物实验研究负载NT-3的聚己内酯/几丁糖多通道神经导管对大鼠坐骨神经缺的修复效果。 研究方法：第一部分研究，通过乙酸为溶剂将聚己内酯（PCL）和几丁糖（CS）共混制得PCL/CS混合溶液，通过烘干法制备PCL/CS中空导管作为，并以水溶性柔性维纶纺织线为模板，通过牺牲模板法制备PCL/CS多通道导管，对两种导管进行材料表征的检测。使用交联剂将NT-3负载于PCL/CS材料中的CS侧链并测试缓释性能。第二部分通过雪旺氏细胞共培养检测材料生物相容性，然后随机选取SD大鼠每组10只制作坐骨神经10mm缺损模型，分别使用PCL/CS-NT3多通道导管、PCL/CS-NT-3中空导管及PCL/CS中空导管修复神经缺损，以自体神经移植为对照组。术后4周、12周时进行运动、感觉功能检测，并在术后12周检测神经电生理、腓肠肌湿重、横切面肌细胞面积、胶原纤维比例、再生神经组织有髓神经纤维计数等，观察导管对神经缺损是修复效果。 结果：成功制备得到PCL/CS多通道神经导管，在拉伸断裂实验、抗弯曲实验和吸水性、亲水性实验中，PCL/CS多通道导管均表现出较中空导管更好的特性，较中空导管结构能更好地维持管腔形态和通道通畅，承受弯曲负荷能力更强，满足作为神经桥接修复材料的要求。NT-3接枝于CS侧链后能够连续稳定地释放，多孔导管组释放速率及浓度均高于中空导管。细胞增殖实验显示24h-48h时三组细胞增殖数量无显著差异（P＞0.05），培养至72h时，PCL/CS-NT-3多通道导管组较PCL/CS中空导管及空白对照组表现出更高的细胞增殖数量，差异显著（P＜0.05）。术后4周时4组大鼠的温觉回缩时间均高于正常值，自体神经组回缩时间显著短于使用人工材料的3组，PCL/CS-NT-3多通道导管组回缩时间也较PCL/CS-NT-3中空导管及PCL/CS中空导管组更短，差异有显著性（P＜0.05）。术后12周时，四组大鼠较术后4周温觉回缩时间均不同程度缩短，而自体神经组大鼠时间最短,PCL/CS-NT-3多通道导管组次之（P＜0.05），但均显著优于PCL/CS-NT-3中空导管组及PCL/CS中空导管组（P＜0.05）。术后4周时四组大鼠术侧后足均表现出不同程度功能障碍，自体神经组优于3个实验组（P＜0.05）。术后12周时，四组大鼠后足功能分别较4周时不同程度恢复，其中自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组恢复情况相近(p＞0.05)，均显著优于PCL/CS中空导管组（P＜0.05）。神经电生理检测，PCL/CS-NT-3多通道导管组和自体神经组CMAP的潜伏期无显著差异（P＞0.05），但均显著短于PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组（P＜0.05）。自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组，PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组的CMAP波幅依次递减，而组间差异均具有显著性（P＜0.05）。自体神经组肌肉湿重恢复率最高，显著高于其他三组（P＜0.05）；而PCL/CS-NT-3多通道导管组次之，显著高于PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组（P＜0.05）。肌细胞截面积：自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组、PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组恢复率依次递减，差异均有统计学意义（P＜0.05）。腓肠肌横截面胶原纤维阳性面积，自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组、PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组胶原纤维比例依次递增，差异显著（P＜0.05）。自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组有髓神经纤维密度较高，两者之间无显著差异（P＞0.05），但均高于PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组（P＜0.05）。免疫荧光自体神经组、PCL/CS-NT-3多通道导管组、PCL/CS-NT-3中空导管组和PCL/CS中空导管组荧光强度依次递减，差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论：综上所述，PCL/CS-NT-3多通道导管表现出较好的力学特性、生物相容性和缓释能力，能促进神经再生和神经功能恢复，表现出对周围神经较大缺损较好的修复能力。
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