摘要
本文基于免疫检测法和酶联信号放大技术，以小分子药物卡马西平以及新型冠状病毒中的刺突蛋白抗原细胞外结构域（ECD）和受体结合结构域（RBD）为研究对象，建立并优化了一种对小分子药物和大分子蛋白质的捕捉和识别的方法，并结合生物膜干涉技术对目标小分子药物和蛋白质进行快速定量检测。本论文由绪论和研究报告两部分组成，绪论部分包括文献综述和本课题研究目的、方案及预期目标，研究报告分为两部分，具体内容如下： 第一部分：建立了抗癫痫药物卡马西平的快速检测方法，以抗体为识别探针，以生物膜干涉法作为检测手段对全血和血清中的卡马西平展开快速定量免疫检测。研究报告了两种类型的FO-BLI（Fiber-opticalbiolayerinterferometry光学探针生物层干涉技术）生物传感器的开发：一种是间接FO-BLI生物传感器，该传感器能够在药物有效浓度范围内特异性定量检测小分子药物卡马西平，而不受其他抗癫痫药物的干扰，另一种是直接FO-BLI生物传感器，利用辣根过氧化物酶HRP和其底物3,3′-二氨基联苯胺DAB的酶促反应进行信号放大，检测灵敏度可以低至10ng/mL，同时将检测时间缩短至约7.5分钟。该方法在定量检测血清和全血的卡马西平中与超高效液相色谱具有一致性。将该方法与超高效液相色谱法比较，两者在血清和全血中具有出色的一致性。 第二部分：建立了新型冠状病毒蛋白ECD和RBD的快速检测方法，以抗体为识别探针，生物膜干涉法作为检测手段对人工唾液和血清中的新型冠状病毒蛋白ECD和RBD展开快速定量免疫检测。该方法对ECD的定量范围为32-720pM；对RBD的定量范围为12.5-400pM。为了降低基质效应，本研究筛选了不同缓冲液，最终选择使用含高盐的SD缓冲液作为实验基础溶液，减少了血清和唾液中的蛋白质等生物小分子对探针表面的非特异性吸附。该方法特异性较高，不受其他冠状病毒蛋白质的干扰。由于待测蛋白质小分子自身分子量较小，导致所测得的信号较小，本研究利用AMEC和HRP之间的反应来产生沉淀，以增强波长偏移，从而增强信号。
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