摘要
苯丙氨酸是酪氨酸的前体，是鱼类生长必需的10种氨基酸之一，参与体内多种氨基酸和分子的合成，在改善鱼类生长、代谢、抗氧化能力和消化能力方面都起着重要作用。本试验以初始体重(37.52±3.92)g的三倍体虹鳟(Oncorhynchusmykiss)为研究对象，研究低鱼粉饲料中不同添加水平苯丙氨酸对三倍体虹鳟生长性能、血清及肝脏抗氧化酶活力、肠道消化酶活力、肝脏组织形态及肠道免疫基因表达的影响。本试验饲料的主要蛋白质源为进口鱼粉、啤酒酵母和豆粕，主要脂肪源为大豆油和鱼油，主要糖源为次粉。将饲料配制成粗蛋白质水平为42.01％，粗脂肪水平为11.57％的等氮等脂饲料并使其作为对照组(苯丙氨酸水平为1.82％)，其他试验饲料在对照组饲料基础上添加0.30％、O.60％、0.90％、1.20％的L-苯丙氨酸，所有试验中的苯丙氨酸水平分别达到1.82％、2.03％、2.29％、2.64％和3.01％。本试验采用全循环水饲养，300尾健康的三倍体虹鳟被随机分为五个处理组(G1～G5组)，每个处理组3个重复，每组20尾。每日早上9:00、下午4:00投喂2次，养殖周期为56d。试验研究结果如下: (1)低鱼粉饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟的生长性能的影响 随着低鱼粉饲料中苯丙氨酸添加量的增加，特定生长率也在2.03％处理组达到峰值，并与对照组之间存在显著性差异(P＜O.05)。试验鱼的增重率在2.03％处理组达到最大值，并与对照组存在显著性差异(P＜0.05)由二次回归方程分析可知，在低鱼粉饲料条件下，三倍体虹鳟对苯丙氨酸的需求量为2.13％(占饲料蛋白质5.19％)。随着苯丙氨酸添加水平的提高，全鱼粗蛋白质含量没有明显变化，每个处理组之间没有显著差异(P＞O.05)。由此可知，在低鱼粉饲料条件下，苯丙氨酸水平达到2.13％时，对三倍体虹鳟生长性能具有明显的改善作用。 (2)低鱼粉饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟肠道消化酶活力的影响 在低鱼粉日粮中添加L.苯丙氨酸，可以提高三倍体虹鳟的肠道消化酶活力。在苯丙氨酸水平为2.03％时，肠道胰蛋白酶活力达到峰值并显著高于对照组(P＜O.05)。在苯丙氨酸水平为2.29％时三倍体虹鳟肠道脂肪酶活力略高于其他处理组，但每个处理组之间没有显著差异(P＞O.05)。在苯丙氨酸水平为2.64％时，肠道淀粉酶活力最强，并显著高于对照组(P＜O.05)。综上所述，日粮饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟消化能力的提高具有改善作用。 (3)低鱼粉饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟血清及肝脏抗氧化能力的影响 在低鱼粉饲料中添加不同水平苯丙氨酸，对三倍体虹鳟血清及肝脏抗氧化能均有显著影响。三倍体虹鳟血清中SOD活力在2.03％组达到峰值，与对照组相比存在显著差异(P＜0.05)。肝脏超氧化物歧化酶活力在2.03％水平时达到最大值，但各个处理组之间差异不显著(P＞0.05)。血清CAT活力先上升后下降，在2.03％水平达到最大值，各个处理组之间并不存在显著差异(P＞0.05)。肝脏过氧化氢酶活力在苯丙氨酸添加量为2.03％时达到峰值并于其他处理组存在显著差异(P＜0.05)。肝脏和血清丙二醛均在2.03％处理组含量最少。血清溶菌酶在2.03％处理组活力最强，并显著高于其他处理组(P＜0.05)。肝脏中溶菌酶活力在2.29％处理组达到最大值，且显著高于1.82％处理组(P＜0.05)。 (4)低鱼粉饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟肠道生长相关基因表达的影响 随着低鱼粉饲料中苯丙氨酸水平的提高，肠道TOR基因表达量在2.03％处理组达到最大值，且显著高于对照组(P＜0.05)。肠道中GHR基因呈现先上升后下降趋势，在2.03％处理组达到最大值，并显著高于其他处理组(P＜0.05)。肠道中IGF-1基因的表达量在2.03％处理组达到最高值并显著高于对照组(P＜0.05)。肠道中IGF-2基因的表达量也在2.03％处理组达到最高值并显著高于对照组(P＜0.05)。S6KI基因也受到TOR上游基因的调控，与TOR基因呈现基本相同的趋势。肠道中4EBP-1基因表达量受到mTOR下游基因调控，在2.29％处理组达到最大值，并显著高于3.01％处理组(P＜0.05)，与对照组没有显著性差异(P＞0.05)。结果说明，在低鱼粉饲料中苯丙氨酸的添加量在2.13％时可以显著提高IGF-1、IGF-2、GH、GHR、mToR和S6K1的基因表达量，从而对鱼体的生长起到一定的改善作用。 (5)低鱼粉饲料添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟肠道免疫相关基因表达的影响 不同苯丙氨酸水平对其肠道免疫相关基因表达产生不同程度影响。其中，IL-1β在2.03％处理组达到最小值，并显著低于其他处理组(P＜0.05)，IL-2在2.03％处理组达到最小值，且显著低于其他2.64％处理组(P＜0.05)。IL-6在2.29％处理组达到最小值，但与其他处理组没有显著性差异(P＞0.05)。TNF-α则在2.29％处理组达到最小值并显著低于其他处理组(P＜0.05)。抗炎因子IL-10在2.03％和2.29％处理组达到最大值，并显著高于其他处理组(P＜0.05)。TGF-β基因表达呈现先上升后下降的趋势，2.29％、2.64％和3.01％三个处理组之间差异不显著，但显著高于对照组。NF-κB基因表达量随着低鱼粉饲料中苯丙氨酸添加量的增加呈现先下降后上升趋势，并在2.03％处理组达到最小值且显著低于其他处理组。 (6)低鱼粉饲料添加苯丙氨酸对肠道紧密连接蛋白相关基因表达的影响 低鱼粉饲料中添加苯丙氨酸对三倍体虹鳟肠道紧密连接蛋白基因的表达具有显著影响。其中，occludin基因表达量在2.03％处理组达到峰值，与其他处理组相比具有显著差异(P＜O.05)。Claudinl基因在2.03％和2.64％处理组显著高于对照组和其他处理组(P＜O.05)。ZO-1基因随着苯丙氨酸的添加量的上升呈现先上升后逐渐降低趋势，在2.03%处理组达到最大值，且显著高于对照组和其他处理组。
NETL