摘要
雄激素性脱发(AGA)是临床最常见的脱发性疾病，主要是由二氢睾酮过度激活毛囊中雄激素受体造成的。非那雄胺(FIN)是一种选择性的Ⅱ型5α-还原酶抑制剂，已被批准用于治疗和预防AGA，FIN通过抑制Ⅱ型5α-还原酶，阻止睾酮转化为活性更强的二氢睾酮，从而降低血液和毛囊中二氢睾酮的含量。但口服FIN会引起严重的全身性不良反应，例如男性乳房发育、性欲降低、勃起功能障碍、射精障碍和情绪障碍等。因此，本论文制备了一种基于类脂囊泡(niosomes,NIS)的非那雄胺纳米系统(FIN-NIS)用于皮肤局部给药，以减少长期口服FIN可能带来的全身性副作用。同时增加FIN在皮肤层，特别是在毛囊中的药物浓度，从而增加药物疗效。 本论文首先建立了高效液相色谱法建立了FIN的体外分析方法，并对FIN进行了处方前研究。结果显示，FIN的logP为1.48；FIN在pH7.4的PBS中溶解度仅为30.61μg/mL，加入乙醇和十二烷基硫化钠能增加其溶解度。 采用乙醇注入法制备FIN-NIS，以FIN-NIS的外观、包封率为考察指标，对FIN-NIS的处方和制备工艺进行了考察，以得到FIN-NIS的最优处方和制备工艺。制备的FIN-NIS的粒径为259.72±0.32nm，多分散指数为0.236±0.006，Zeta电位为-26.21±0.56mV，包封率为94.00±0.86%，透射电镜图像显示FIN-NIS呈类球形，表面光滑且具有良好的分散性。通过DSC与XRD研究了FIN-NIS中的药物状态，结果显示FIN-NIS中药物典型的晶型与热行为消失，说明疏水性药物FIN成功嵌入到载体的疏水双分子层中。以粒径和多分散指数为考察指标，研究了FIN-NIS在不同温度下的物理贮存稳定性，结果表明，FIN-NIS的物理贮存稳定性良好。体外释放研究结果表明，FIN-NIS具有一定的缓释长效作用。 以非那雄胺混悬液、非那雄胺水醇溶液作对照，通过Franze扩散池法研究了FIN-NIS的皮肤渗透性与滞留性。结果显示，非那雄胺混悬液的累积透皮量最低，经皮渗透速率仅为0.34±0.01μg/cm2/h，全皮肤中的药物保留量为12.95±0.09μg/cm2，毛囊中基本检测不到药物。非那雄胺水醇溶液中显示最高的累积透皮量和经皮渗透速率，全皮肤层与毛囊中药物的保留量分别为26.9±0.02μg/cm2、1.08±0.06μg/cm2。FIN-NIS的累积透皮量和经皮渗透速率与药物水醇溶液相似，但药物在全皮肤层、毛囊中的保留量分别为52.61±0.01μg/cm2、21.04±0.04μg/cm2，约为水醇溶液的2、20倍，说明FIN-NIS可以提高皮肤尤其是毛囊部位的药物浓度。以香豆素6(Cou6)作为荧光标记物，制备荧光标记的类脂囊泡系统(Cou6-NIS)，以Cou6混悬液和Cou6水醇溶液为对照，通过荧光显微镜对载有荧光探针的类脂囊泡系统在皮肤上的渗透行为进行了可视化研究，进一步评估该类脂囊泡系统向皮肤深层输送亲脂药物的能力。结果显示，施用Cou6-NIS的皮肤切片显示出最高的荧光强度，表明该类脂囊泡系统可促进药物在皮肤中的渗透与蓄积。 以睾酮诱导的C57BL/6小鼠为雄激素脱发模型，初步研究了FIN-NIS对AGA小鼠毛发再生的治疗效果。结果显示，非那雄胺混悬液组小鼠直到第21天才出现较少的色素沉着，28天后约有20-40%的脱毛区出现了毛干，恢复毛发生长效果并不理想，且毛囊数目少，大部分仍处于休止期。然而，FIN-NIS组小鼠在第14天就出现了毛轴，在第21天脱毛区域基本覆盖了毛发，且FIN-NIS组小鼠毛囊数量最多，毛囊微小化不明显，毛干色素较深，大部分毛囊处于生长期。结果表明，相较于非那雄胺混悬液，FIN-NIS可更好地促进AGA小鼠的头发再生，其效果甚至超过了阳性对照药物米诺地尔。 最后，研究了非那雄胺类脂囊泡单次和多次给药后对完整皮肤和破损皮肤的刺激性。结果显示，FIN-NIS单次和多次给药后，在去除受试物后的1、24、48、72h的四个时间点中，完整皮肤组和破损皮肤组的给药区皮肤状态与给生理盐水对照区相同，均未见异常，未出现明显红斑、水肿情况，刺激反应平均值均小于0.5。结果表明，FIN-NIS的皮肤刺激性较小。
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