摘要
研究背景：系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus,SLE）是一种在育龄期女性群体中高发的自身免疫性疾病。患者体内有多种自身抗体的形成，可导致机体的炎症反应和多器官功能损伤。一项全球性研究显示SLE患病率为每年9-241/10万人，SLE的发病机制仍未明确，目前的研究认为其发病与遗传、性激素和环境因素共同作用有关。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类内源性RNA，该类RNA的结构具有特殊性，整体呈封闭循环状态，不仅影响着基因的表达，同时在基因调控的过程中也发挥着重要的作用。相较于线性RNA，circRNA稳定性更好，表达水平也更高。现有的研究显示:circRNA的表达失调与疾病的发展密切相关，其在恶性肿瘤、自身免疫病等发病中发挥重要的作用。 本研究通过分析外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells，PBMCs）RNA-seq测序数据结果，筛选出3种显著性（p＜0.01，fold change(差异值)＞2）差异基因circADCY9，circGARS和circMCTP2为研究对象。通过qRT-PCR技术检测这些基因的表达水平，并评估circRNA的稳定性，进一步探究其耐受程度。此外，收集SLE临床指标，探讨circRNA在临床诊断中的应用价值，分析其作为标志物的可能性。 研究目的：检测三种circRNA在SLE患者PBMCs中的表达水平，探讨这三种circRNA的稳定性及与SLE疾病的病情严重程度的相关性，分析评估其潜在的诊断价值及意义。 研究方法：收集36例SLE患者（实验组）及25例健康对照者（对照组）外周血，提取PBMCs，采用qRT-PCR检测circADCY9，circGARS，circMCTP2的表达水平，分析三种环状RNA表达水平与临床指标的关联，通过绘制并分析受试者工作特征曲线（ROC），探究三种环状RNA的诊断价值，通过RNaseR处理检测三种环状RNA分子的稳定性及耐受程度，选取circADCY9分子PCR产物电泳检测结果验证其稳定性。 研究结果：（1）qRT-PCR分析结果表明，circADCY9和circGARS在SLE患者PBMCs中表达上调，circMCTP2表达下调（P值均＜0.0001）；（2）SLE患者circADCY9，circGARS表达水平与SLE疾病活动指数-2000（SLEDAI-2000）呈正相关，与补体C3呈负相关，circMCTP2表达水平与SLEDAI-2000评分呈负相关，与补体C3呈正相关；（3）SLE患者和健康对照组circADCY9、circGARS、circMCTP2分子ROC的曲线下面积（AUC）分别为0.8500、0.8267、0.8956；（4）RNaseR处理前后3种circRNA表达情况较为稳定，PCR产物凝胶电泳结果显示：circRNA相较于mRNA对RNaseR的耐受性更好。 研究结论：1：与健康对照者相比，SLE患者PBMCs中circADCY9，circGARS，circMCTP2的表达明显异常，提示三种circRNA的异常表达可能与SLE疾病的发生有关。 2：circADCY9，circGARS，circMCTP2不仅具有较高的稳定性，且与疾病的严重程度相关，具有较好的临床诊断价值，有望成为SLE诊断的潜在生物标志物。
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