摘要
目的： 1.观察趋化因子配体20(Chemokine ligand20，CCL20)在慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic liver failure，ACLF）大鼠中的表达规律及在Th17细胞分化的免疫调控网络中的作用。 2.阐明解毒化瘀Ⅱ方对ACLF中CCL20的影响及在Th17细胞分化免疫网络的调控作用。 方法： 以四氯化碳（CCL4）联合D-氨基半乳糖（D-GalN）和脂多糖（LPS）建立ACLF大鼠模型，分为正常组（Normal）、肝硬化组（LC）、ACLF组（Model）、解毒化瘀Ⅱ方组（JDHY），模型建立成功后以Masson染色、HE染色观察观察肝组织纤维化程度及坏死程度，观察各组存活率。采用WB检测肝组织中CCL20含量，流式细胞术检测外周血中Th17比例，ELISA法检测CCL20、IL-17、IL-21、TNF-α、AST、ALT含量，全自动生化分析仪检测血清中TBiL含量。 结果： 1.存活率：Normal组存活率100%，LC组存活率93.3%，Model组存活率46.7%，JDHY组存活率76.7%。与Normal组比较，Model组存活率显著降低，差异有统计学意义（X2=10.1953，P＜0.05）。与Model组比较，JDHY组大鼠存活率显著升高，差异具有统计学意义（X2=4.5123，P＜0.05）。 2.病理：Normal组HE染色可见结构完整的肝小叶，无假小叶结节形成，细胞核未见变性及坏死。LC组Masson染色示肝小叶结构完整性被破坏，假小叶结节形成，汇管区及其周围纤维组织增生。Model组HE染色可见肝小叶结构被破坏且模糊不清，大部分肝细胞可见明显变性、坏死，可见细胞核固缩、碎裂、溶解。JDHY组见不同程度的肝小叶结构破损，可见少量细胞核固缩、碎裂、溶解，与Model组相比，JDHY组肝细胞变性、坏死较轻。 3.与Normal组比较，肝组织中CCL20表达水平在LC组及Model组均明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；且Model组CCL20表达水平升高更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）；与Model组对比，JDHY组CCL20表达水平明显下调，差异有统计学意义（P＜0.05）。 4.与Normal组比较，LC组、Model组外周血中Th17含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与LC组比较，Model组外周血中Th17含量明显升高明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与Model组对比，JDHY组外周血Th17含量明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。较之Normal组，LC组、Model组肝组织匀浆中IL-17、IL-21、TNF-α含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与LC组比较，Model组肝组织匀浆中IL-17、IL-21、TNF-α含量明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与Model组对比，JDHY组肝组织匀浆中IL-17、IL-21、TNF-α含量明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。 5.与Normal组比较，LC组、Model组AST、ALT、TBiL水平明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与LC组比较，Model组AST、ALT、TBiL水平明显升高，差异有统计学意义（P＜0.05）；与Model组对比，JDHY组AST、ALT、TBiL水平明显下降，差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论： 1.CCL20在ACLF中明显升高，正向促进ACLF肝细胞的炎症坏死。其作用途径可能是通过募集Th17细胞，刺激Th17分泌IL-17、IL-21、TNF-α等细胞因子扩大炎症，从而加重ACLF肝细胞炎症坏死。 2.解毒化瘀Ⅱ方可能通过降低ACLF中CCL20的表达，减少Th17的聚集，抑制Th17/IL-17炎症轴的活性，从而减轻ACLF免疫炎症损伤，保护肝功能。
NETL