摘要
目的： 实验在化瘀通便汤临床疗效观察评价及研究的基础上，论证大黄粉制备慢传输型便秘（STC）大鼠模型的可行性，证实“活血化瘀，解毒通络”的组方药物对STC大鼠结肠的动力学改变，研究活血化瘀解毒通络中药复方对慢传输型便秘大鼠模型的肠道运动功能以及结肠组织P2X2受体表达的影响,探索活血化瘀解毒通络中药复方在治疗慢传输型便秘中可能的作用机制。从分子、免疫等多层次揭示“久病血瘀，瘀毒损络”是STC的病机，揭示“活血化瘀，解毒通络”治法治疗STC的机理和新的效用靶点。 方法： 1.慢传输型便秘大鼠模型的制备。2.评价STC造模成功后，将各模型组分别给予化瘀通便汤及莫沙必利进行治疗干预，模型对照组及空白对照组则不予任何药物，灌服等体积量蒸馏水。3.碳末推进率测定。4.应用Western-blot及RT-PCR检测远端结肠组织肠间及黏膜下丛中P2X2受体的表达情况。5.应用SPSS17.0统计软件对实验数据进行统计分析。 结果： 1.慢传输型便秘大鼠模型的制备 实验应用大黄剂量递增三轮循环法，造模历时91天。与空白对照组比较，模型组大鼠体质量增长较少（P＜0.05），大鼠粪便有裂痕、变短。模型组大鼠首次排黑便时间延长（P＜0.05）。模型组大鼠24小时粪便重量轻（P＜0.05）。 2．化瘀通便汤对慢传输型便秘大鼠结肠组织P2X2受体表达的影响 2.1造模组和对照组中P2X2的mRNA表达水平 与空白对照组比较，模型对照组P2X2的mRNA表达显著升高（P＜0.01），各给药组与模型对照组比较，P2X2mRNA不同程度的降低（P＜0.01），与西药对照组比较，化瘀通便汤中剂量组、高剂量组P2X2mRNA表达水平无差异（P＞0.05），化瘀通便汤低剂量组影响P2X2的mRNA表达不明显（P＜0.05）。 2.2对照组和造模组中P2X2的蛋白表达水平 与空白对照组比较，模型对照组P2X2相对灰度值表达显著升高（P＜0.01），各给药组与模型对照组比较，P2X2相对灰度值不同程度降低（P＜0.01），与西药对照组比较，化瘀通便汤中剂量、高剂量组P2X2相对灰度值无差异（P＞0.05），化瘀通便汤低剂量组P2X2相对灰度值有差异（P＜0.05）。 结论： 1.大黄粉可成功制备慢传输型便秘大鼠模型 大黄粉制备慢传输型便秘大鼠模型，符合患者疾病形成过程，可以成功复制，供进一步动物实验使用。 2.慢传输型便秘大鼠便秘的发生可能与远端结肠组织中P2X2受体表达变化有关 慢传输型便秘大鼠便秘的发生可能与远端结肠组织中P2X2受体的表达升高有关。 3.化瘀通便汤影响慢传输型便秘大鼠远端结肠P2X2的表达 化瘀通便汤影响慢传输型便秘治疗STC的机制可能与下调大鼠远端结肠组织中的P2X2受体的表达有关。
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