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犬炎性乳腺癌细胞的分离培养与鉴定

高鸿博

犬炎性乳腺癌细胞的分离培养与鉴定

高鸿博1
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作者信息

  • 1. 华中农业大学
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摘要

背景:原发性犬乳腺肿瘤具有与人乳腺癌相似的流行病学和生物学特征。犬乳腺肿瘤具有更高的发病率和更快的疾病进程,一直是人类乳腺肿瘤研究的理想模型。在全球的犬乳腺肿瘤的研究中,虽然已经建立起一些稳定、长久传代的细胞系,但其中犬炎性乳腺癌细胞系数量极少,且犬乳腺肿瘤细胞组织形态学比较复杂,目前临床上尚未建立完善的犬乳腺肿瘤细胞系,阻碍了对于犬乳腺肿瘤的进一步研究。 目的:通过对临床犬乳腺肿瘤的病例收集、恶性肿瘤细胞的原代培养,建立新的犬乳腺肿瘤细胞系,进一步了解其生物学特性,并利用此细胞系进行动物造模。为犬乳腺肿瘤在临床上的诊断与治疗方式提供依据,以丰富其个性化治疗手段,降低患犬的死亡率和复发率,也可能对人乳腺肿瘤进行准确诊断和治疗及判断预后提供参考。 方法:采用原代细胞培养获得稳定传代犬乳腺肿瘤细胞,通过形态学观察、染色体分析、生长曲线绘制和增殖倍增时间计算、细胞集落形成、免疫组织化学法(IHC)、细胞免疫荧光(IF)以及裸鼠成瘤模型的建立,对其生物学特性进行鉴定。 结果:共收集23例犬乳腺肿瘤样本进行原代培养,并成功筛选出一株能够在体外稳定传代50余代,且能够在小鼠体内成瘤的细胞系,根据患犬临床症状和原发肿瘤组织病理学结果诊断为犬炎性乳腺癌(IMC),该细胞系命名为IMC-118。IHC结果表明该乳腺肿瘤雌激素受体(ER)表达为阴性,孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER-2)表达为弱阳性,Ki-67表达为强阳性,符合LuminalB型乳腺肿瘤的受体表达特征。IMC-118细胞系呈现上皮样细胞的形态特征,染色体分析结果显示染色体数目异常,普遍呈现非整倍体变异。IF的结果显示该细胞系处于上皮-间质转化(EMT)状态。IMC-118细胞系能够在免疫缺陷的小鼠成瘤,异种移植瘤的免疫表型与原发肿瘤一致。 结论:本研究成功培养和鉴定了一株犬炎性乳腺癌细胞系,并能在免疫缺陷小鼠成瘤,可运用于后续炎性乳腺癌相关的生物学研究。

关键词

犬乳腺肿瘤/细胞系/生物学特性

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授予学位

硕士

学科专业

兽医

导师

邱昌伟

学位年度

2022

学位授予单位

华中农业大学

语种

中文

中图分类号

S8
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