摘要
禽致病性大肠杆菌以及禽沙门菌都是家禽养殖过程中常见致病菌，给我国畜牧业造成巨大损失，当前主要使用抗生素防治两种疾病，但抗生素的不规范应用，导致耐药菌增多、环境污染、威胁人类健康等问题。随着减抗限抗政策的实施，养殖业对抗生素替代产品的需求愈发迫切。噬菌体具有高效杀菌、安全、无污染等优势，是一种理想的细菌性疾病防治药物和饲料添加剂。 在实验室前期研究的基础上，复苏裂解谱广的5株禽沙门菌噬菌体和7株禽大肠杆菌噬菌体，测定生物学特性，配成噬菌体鸡尾酒，测定裂解谱。通过在大型养鸡场饮水噬菌体鸡尾酒验证其对肉鸡生长性能、肠道健康等方面的影响。探究噬菌体鸡尾酒作为新型饲料添加剂的可行性。具体结果如下： 1.噬菌体复苏、纯化及生物学特性测定 复苏7株大肠杆菌噬菌体、5株沙门菌噬菌体及其宿主菌，增殖后纯化。 测定得到12株噬菌体的最佳感染复数。 热稳定性测定结果显示：12株噬菌体在40℃、50℃条件下均能保持效价不变；；当温度提高至70℃，噬菌体存活率急剧下降。结果表明12株噬菌体在常温条件下可以保持高存活率，但不耐高温。 pH稳定性测定结果显示：12株噬菌体在pH值4-11的情况下，均能保持高活性，但在pH＜3或pH＞11时噬菌体活性急剧下降。表明12株噬菌体在pH值4-11时可以保持活性稳定，但不耐强酸强碱。 2.噬菌体鸡尾酒配制及裂解谱测定 配制噬菌体鸡尾酒，噬菌体鸡尾酒总效价为5×108PFU/mL。 裂解谱测定：噬菌体鸡尾酒对来自湖北256株禽源沙门菌总裂解率达到96.09%（246/256）；对来自湖北743株禽源致病大肠杆菌的总裂解率达到97.98%（728/743）。 3.噬菌体鸡尾酒应用的研究 将28日龄42400只肉鸡随机分2组（噬菌体组、抗生素组），结果如下： 噬菌体鸡尾酒对生长性能的影响：与抗生素组相比，噬菌体组日均增重比抗生素组提高1.1%（P＞0.05）；平均日采食量降低5.75g（6.3%）、料重比显著降低9.7%（P＜0.05）。结果表明与抗生素相比，噬菌体鸡尾酒可以显著降低肉鸡料肉比。 噬菌体鸡尾酒对肠道结构、肠道屏障的影响：与抗生素组相比，噬菌体组绒毛高度极显著提高9.1%（P＜0.01）、VH/CD值极显著提高6.5%（P＜0.01），对隐窝深度无显著影响（P＞0.05）；显著提高肉鸡空肠ZO-1和Claudin-1的表达量（P＜0.05）；Occludin的表达量无明显差别（P＞0.05）；空肠黏液蛋白MUC-2的表达量显著提高（P＜0.05）。结果表明与抗生素相比，噬菌体鸡尾酒可以显著改善肉鸡肠道组织形态、显著改善肉鸡肠道物理屏障以及肠道化学屏障。 噬菌体鸡尾酒对肠道炎症因子的影响：与抗生素组相比，噬菌体鸡尾酒对肠道IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达量无影响（P＞0.05）。 噬菌体鸡尾酒对肠道菌群的影响：与抗生素组相比，噬菌体组盲肠大肠杆菌量、沙门菌量差异不显著（P＞0.05），乳酸杆菌丰度显著升高（P＜0.05）。说明噬菌体鸡尾酒与抗生素相比可以提高肠道内乳酸杆菌丰度，同时具有与抗生素相同的杀灭病原菌的作用。 综上所述：与抗生素相比，噬菌体鸡尾酒可以提高肉鸡日均增重，降低料肉比，改善肉鸡生长性能；改善肠粘膜结构，增强肉鸡肠道物理屏障和化学屏障；减少肠道病原菌，提高肠道内乳酸杆菌含量，促进肠道菌群平衡，保障肠道健康。研究证明噬菌体鸡尾酒是替代抗生素产品的有效选择之一。
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