摘要
褐飞虱(Nilaparvatalugens)作为以水稻为食的单食性害虫,通过取食和产卵为害水稻,给我国乃至东南亚的粮食生产都造成了巨大的损失。鞣化激素作为昆虫蜕皮过程中最后一个环节发挥作用的激素,主要调节昆虫在蜕皮后,柔软表皮的硬化与黑化。 本研究通过基因克隆得到褐飞虱鞣化激素的两个单体基因,同源性分析发现在不同昆虫中鞣化激素的氨基酸序列高度相似,且Nlbursicon-α和Nlbursicon-β都有11个半胱氨酸残基。通过qRT-PCR技术分析鞣化激素在褐飞虱不同发育时期和不同组织的表达模式,发现鞣化激素都在褐飞虱各龄期的初期和末期表达量最高,在胸部神经节也为高表达。运用RNAi技术分析鞣化激素在褐飞虱中的功能,结果表明,3龄褐飞虱若虫被干扰后,在进入成虫之前无明显表型,但羽化后褐飞虱会出现翅不能正常伸展的现象,然而未表现出表皮不能正常鞣化。通过酵母双杂实验找到了16个与Nlbursicon-α和Nlbursicon-β互作的蛋白,并就Nlbursicon-β和NlML的互作关系进行了GSTpull-down验证,初步在体外证实了两者的互作关系。本论文加深了我们对鞣化激素功能多样性的认识,为进一步了解褐飞虱的蜕皮机制提供参考。