摘要
沟叶结缕草(Zoysiamatrella(L.)Merr.)，禾本科多年生暖季型草坪草，由于其质地细密、坪观质量好、生长势和扩展性强、耐盐、耐阴等优点，常应用于我国南方地区园林绿化和城市建设。沟叶结缕草主要通过体细胞变异和遗传转化等现代育种技术进行品种选育。沟叶结缕草的选育离不开人工快速扩繁，即要先建立其高效再生体系，再生能力强的胚性愈伤组织则是其再生体系建立的重要基础。 然而沟叶结缕草愈伤组织诱导成功率低，愈伤组织生长慢，维持难，在往年研究中随着离体培养时间和继代次数的增多，胚性愈伤组织的再生率逐渐降低，甚至胚性愈伤组织也会退化成非胚性，想获得高质量的胚性愈伤组织依然是个难题。本文主要研究褪黑素（MT）、玉米素（ZT）、表油菜素内酯（EBL）、氯化钙（CaCl2）四种外源添加剂及其不同浓度组合，对沟叶结缕草愈伤组织的生长和再生的影响,通过形态特征及生理指标的变化分析，筛选出适合胚性愈伤组织增殖和再生的添加剂浓度及组合,进一步完善沟叶结缕草再生体系。主要研究结果如下： 1.在培养基中添加不同浓度的MT时，20mg·L-1是外源MT处理促进愈伤组织增殖的最优浓度，15mg·L-1是促进愈伤组织再生的最优浓度。 2.在愈伤组织的继代生长中，使用不同浓度的单一添加剂处理，以下四个浓度处理胚性愈伤组织的增殖效果最佳：20mg·L-1MT，0.15mg·L-1ZT，0.01mg·L-1EBL，10mg·L-1CaCl2。CaCl2对愈伤组织增殖生长的促进效果不明显，且20mg·L-1的CaCl2对愈伤组织的增殖生长有抑制作用。当不同浓度添加剂组合处理时,促进沟叶结缕草愈伤组织继代生长的最优组合为0.15mg·L-1ZT，0.02mg·L-1EBL，20mg·L-1MT，10mg·L-1CaCl2，且组合添加剂处理的愈伤组织的胚性保持度优于单一添加剂，有利于沟叶结缕草再生体系的建立。 3.在愈伤组织的再生培养中，单一添加剂对愈伤组织再生的促进效果从高到低依次为：0.15mg·L-1ZT,0.02mg·L-1EBL,15mg·L-1MT。不同添加剂组合处理时,CaCl2对愈伤组织再生没有促进作用，配比为0.15mg·L-1ZT，0.02mg·L-1EBL，15mg·L-1MT是最佳浓度组合，此时愈伤组织再生率较高，再生根生长情况较好。 4.愈伤组织再生培养的0-4周，15mg·L-1MT，0.02mg·L-1EBL和0.15mg·L-1ZT处理的愈伤组织在第4周的POD活性明显低于其他处理组，SOD活性高于其他组，CAT、POD活性变化速率明显高于其他处理组。说明通过测定其抗氧化酶活性高低及变化速率可提前预测其再生能力的强弱，从而提高培育再生苗的效率，进一步完善沟叶结缕草的高效再生体系。
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