摘要
目的： 本研究在中国人群中运用孟德尔随机化方法，使用身体质量指数(Body mass index,BMI)关联的遗传变异构建遗传风险评分（Genetic risk score，GRS），以此作为工具变量，分析肥胖与原发性肝癌发生风险的因果关联。 方法： 1、采用性别、年龄频数匹配的病例对照研究方法。于2010年10月至2018年10月在南方医科大学顺德医院募集新发肝癌病例，共纳入1285例；以及募集同时期同地区的医院和社区的1285例正常对照。 2、选择GWAS报道且已在亚洲人群验证的8个BMI关联的遗传变异作为目标遗传变异（rs17782313、rs12597579、rs261967、rs10767664、rs9356744、rs10938397、rs1137101、rs7498665），应用TaqMan荧光定量PCR技术进行基因分型。 3、按四分位数法将BMI分成4个等级，在病例对照中应用多因素Logistic回归模型估计BMI与肝癌发生风险的观察效应。 4、使用BMI关联遗传变异对BMI的效应值和风险等位基因构建未加权GRS和加权GRS，按四分位数法将未加权GRS和加权GRS分成4个等级，在1285例健康对照中采用多重线性回归模型估计GRS与BMI关联效应，通过计算F统计量来检验弱工具变量。 5、在病例对照中，采用多因素Logistic回归模型估计GRS与肝癌发生风险的关联效应。 6、使用公式：ORIV=exp(Ln(ORGRS-肝癌)/βGRS-BMI)，计算BMI对肝癌发生风险的期望效应。 7、运用Z检验对BMI与肝癌发生风险的观察效应和期望效应进行孟德尔随机化检验。 8、使用线性回归模型和Logistic回归模型检验遗传变异和遗传风险评分与混杂因素的多效性。 结果： 1、在多因素模型分析中，调整协变量后，结果表明肝癌发生风险随BMI等级升高而降低。其中，BMI为最高等级的个体发生肝癌的风险较BMI最低等级者降低了68%（调整OR=0.32，95%CI=0.24-0.43）。 2、GRS与BMI关联分析结果显示，未加权GRS每增加一分和一个等级，BMI分别增加0.04倍标准差和0.05倍标准差（标准差：1.68kg/m2），未加权GRS Q4等级使BMI增加0.21倍标准差；加权GRS每增加一分和一个等级，BMI分别增加0.23倍标准差和0.05倍标准差。未加权GRS和加权GRS的F统计量分别为12.43和11.65，未加权GRS和加权GRS的统计效能均为100%。 3、GRS与肝癌发生风险关联分析结果显示，调整性别、年龄、肿瘤家族史和BMI后，未加权GRS最高风险等级的肝癌发生风险增加了4%（调整OR=1.30，95%CI=1.04-1.63）；而加权GRS最高风险等级的肝癌发生风险增加了26%（调整OR=1.26，95%CI=1.01-1.58）；另外，加权GRS每增加一个等级，肝癌发病风险增加8%（调整OR=1.08，95%CI=1.00-1.16）。 4、BMI最高等级对肝癌的期望效应值为1.45（调整OR=1.45，95%CI=1.06-4.91），高于观察效应值0.32（调整OR=0.32，95%CI=0.24-0.43），Z检验表明，期望效应值与观察效应值的差异具有统计学意义（P＜0.001）。 5、多效性检验结果表明，各遗传变异与遗传风险评分均未与混杂因素存在统计学关联。 结论： 病例对照研究中所发现的肥胖与肝癌的关联性可能由于混杂偏倚和反向因果关联所导致，孟德尔随机化研究结果表明肥胖与肝癌发生之间存在因果关联，肥胖能增加肝癌发病风险。本研究结果仍需大样本的孟德尔随机化研究进一步证实。
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