摘要
目的:行为学中的黑白箱实验已经被广泛应用于评估失明小鼠视觉功能的恢复情况。目前对于不同年龄阶段C57BL/6J小鼠(以下简称小鼠)黑白箱实验数据的差异仍缺乏研究。闪光视网膜电图(flash electroretinogram,FERG)是视网膜受到光刺激后,视网膜细胞产生的一系列电反应所形成的波形。FERG的结果受麻醉剂剂量和种类的影响。本研究比较了不同剂量水合氯醛和三溴乙醇作用下的FERG结果,并研究了不同年龄阶段小鼠表现出的FERG差异。 方法:(1)设置白箱光照强度分别为300lux、900lux、1500lux。小鼠经过12h暗适应后,进行黑白箱实验。(2)8周龄(8weeks,8w)小鼠暗适应12h后,分别应用水合氯醛(400mg/kg、500mg/kg、600mg/kg)和三溴乙醇(280mg/kg、300mg/kg和320mg/kg)麻醉进行FERG实验。其中,暗适应光刺激强度分别为-3.6、-2.6、-1.6、-0.6、0.4、2.15logcd·s·m-2;明适应光刺激强度分别为-0.6、0、0、1、1.4logcd·s·m-2。(3)比较各组之间的FERG结果确定麻醉剂的种类及剂量,并选用该麻醉剂量的麻醉剂分别对4w、5w、6w、8w的小鼠进行FERG实验。 结果:(1)黑白箱实验中,随着光照强度增加,6周龄小鼠在白箱和黑箱中的持续时间、总路程、静止时间等具有相同的变化趋势。(2)500mg/kg水合氯醛作用下,获得的小鼠的a波、b波幅值和潜伏时间均较小,但是Ops波振幅最大。300mg/kg三溴乙醇剂量下,小鼠的a波、b波幅值较大,a波、b波潜伏时间较短。(3)暗适应FERG中,水合氯醛作用下的a波幅值更大,三溴乙醇作用下获得的b波振幅更高。明适应FERG中,水合氯醛组的a波、b波幅值均比三溴乙醇组大,但是潜伏时间比三溴乙醇组短。(4)当暗适应光刺激强度分别为0.4、1.4、2.15logcd·s·m-2时,4w组a波潜伏时间最长,b波幅值最大;6w组a波振幅最小,b波潜伏时间最长,Op3、Op4以及总Op振幅明显低于其他组;8w组的Op4、Op5以及总Op幅值大于其余三组。在明适应0、0.6、1、1.4logcd·s·m-2光刺激强度下,a波振幅在4w时最大,6w时最小,而b波振幅在8w时最大,且4w组的a波和b波潜伏时间最长。 结论:6w后的小鼠具有畏光行为。并且在黑箱中的持续时间、路程、平均速度、静止时间等具有相同的变化趋势。对于FERG,应选择300mg/kg三溴乙醇和8w小鼠进行实验。