摘要
目的：对2015年版《中国药典》阿胶的鉴定项和含量测定项检测方法进行优化，提高其实用性。运用多元多息分析方法对阿胶及其他动物皮胶进行检测，借用多元统计分析方法对检测数据进行归纳分析，力求找到阿胶与其他动物皮胶的差异，为阿胶的真伪鉴别提供新的思路。 方法：应用2015年版《中国药典》阿胶的鉴定项和含量测定项检测方法对收集到的不同厂家阿胶以及不同动物皮胶样品进行检测，验证药典方法，寻找应用中的不足，开展优化研究。分别应用UV、HPLC、ICP-MS、离子交换色谱等方法对阿胶及不同动物皮胶进行检测，利用检测数据建立多元统计分析模型，对其进行区分。 结果： 1．对2015年版《中国药典》阿胶的鉴定项进行了优化，增加了牛皮胶特征多肽和猪皮胶特征多肽的检测，能够有效鉴别出掺牛皮胶和猪皮胶的阿胶伪品；建议以模糊校正因子为指标制定阿胶特征多肽的含量范围，大约在0.8～1.4之间，为掺伪阿胶的鉴定提供了新的思路。 2．对2015年版《中国药典》阿胶的含量测定项进行了优化，更改了流动相与进样体积；采用一测多评的方法，以甘氨酸为参照控制L－羟脯氨酸、丙氨酸、L－脯氨酸3种氨基酸的含量，实现利用甘氨酸一种对照品同时测定样品中4种氨基酸的含量。 3．将13个不同动物皮胶样品的紫外吸收光谱数据进行聚类分析，结果显示4种动物皮胶聚为两大类，猪皮胶聚为一类，其他动物皮胶聚为一类。 4.应用考马斯亮蓝染色法对18批阿胶、伪品阿胶及不同动物皮胶样品进行了蛋白质含量测定，结果阿胶、牛皮胶、马皮胶蛋白质含量结果比较相近，猪皮胶的含量稍低。2批网购伪品阿胶与1批假福胶蛋白质含量与正品相近，无显著差异。 5．测定了25批不同动物皮胶17种氨基酸的含量。建立了不同厂家17种AA含量的PLS-DA模型，能够有效的区分福牌阿胶和东阿阿胶；建立了不同动物皮胶17种氨基酸含量的OPLS-DA模型，能够有效区分阿胶、牛皮胶、马皮胶、猪皮胶4种动物皮胶，并且由OPLS-DA散点图得出结论L-脯氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、丙氨酸在4种动物皮胶中的含量差异较大，是4种动物皮胶的差异性成分。 6.测定了3个厂家17批阿胶4种游离氨基酸的含量，总结了游离氨基酸的含量范围；建立了不同厂家4种游离氨基酸含量的PLS-DA模型，能够有效的区分福牌阿胶、东阿阿胶和宏济堂阿胶。 7.不同动物皮胶以及不同厂家阿胶样品Cl-，SO42-，NO3-，PO43-4种阴离子含量有差异，其中，猪皮胶含有PO43-，而其他动物皮胶未检出；华鹏阿胶中只检出Cl-，SO42-，两种阴离子，其他动物皮胶及其他品牌阿胶中均检出Cl-，SO42-，NO3-三种阴离子；猪皮胶中Cl-含量较高；宏济堂阿胶SO42-含量最高，其他品牌阿胶及其他动物皮胶均是Cl-含量最高。 8.建立了4种不同动物皮胶样品的17种微量元素含量的PLS-DA模型，能够有效的区分不同动物皮胶，并且由OPLS-DA的S-Plot图得出结论Na、K、Ca、Mg4种元素在不同动物皮胶中的含量差异较大，是4种动物皮胶的差异性元素。 结论： 优化后的药典方法重复性好，可操作性强，更适于阿胶中4种氨基酸的含量测定及掺假阿胶的鉴定；不同厂家阿胶及不同动物皮胶在紫外光谱、蛋白质含量、AA含量、游离AA含量、微量元素含量及阴离子含量上有差异。紫外光谱法可以有效区分猪皮胶和其他动物皮胶；17种AA含量的PLS-DA模型，能够有效的区分福牌阿胶和东阿阿胶；17种氨基酸含量的OPLS-DA模型，能够有效区分阿胶、牛皮胶、马皮胶、猪皮胶4种动物皮胶；4种游离氨基酸含量的PLS-DA模型，能够有效的区分福牌阿胶、东阿阿胶和宏济堂阿胶；17种微量元素含量的PLS-DA模型，能够有效的区分阿胶、牛皮胶、马皮胶、猪皮胶4种动物皮胶。通过本文的研究，对阿胶的药典方法进行了优化，并采用模式识别的方法实现了对不同厂家、不同动物皮胶的识别，为阿胶的质量评价及鉴定提供了新的思路和方法。
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