摘要
目的： 探讨miR-326调节滋养细胞增殖及侵袭在子痫前期发病过程中的作用，为子痫前期的诊疗提供新的理论基础。 方法： 1.标本： （1）收集正常妊娠妇女(n=6)胎盘组织及子痫前期孕妇(n=6)胎盘组织。 （2）滋养细胞HTR-8/SVneo和JEG-3。 2.实验方法： （1）应用qRT-PCR技术检测胎盘组织中miR-326的表达水平。 （2）应用Transwell、CCK-8与克隆形成实验检测被转染滋养细胞的侵袭和增殖能力变化情况。 （3）在线数据库TargetScan预测miR-326可能的靶基因。 （4）应用qRT-PCR技术和Westernblot检测相关分子的miRNA及蛋白的表达水平。 （5）建立靶蛋白的过表达和敲减细胞株。 （6）应用miR-326类似物和PAX8过表达慢病毒同时处理并转染滋养细胞，检测滋养细胞的侵袭及增殖能力的变化。 结果： 1.子痫前期患者胎盘组织中miR-326表达水平显著高于正常妊娠妇女胎盘组织。 2.MiR-326类似物能使滋养细胞HTR-8/SVneo中miR-326过表达，并能显著抑制滋养细胞的增殖能力和侵袭能力。MiR-326抑制剂抑制滋养细胞miR-326的表达，并能显著增强滋养细胞JEG-3的增殖能力与侵袭能力。 3.线上数据库（TargetScan、miRDB和microRNA.org）预测miR-326的下游靶基因为PAX8。 4.PAX8的过表达慢病毒与敲减载体转染效率较高。 5.过表达PAX8滋养细胞JEG-3的增殖能力与侵袭能力显著提高，敲减PAX8的滋养细胞HTR-8/SVneo的增殖能力和侵袭能力显著下降。 6.将miR-326类似物处理的滋养细胞HTR-8/SVneo再转染PAX8过表达慢病毒，结果发现升高miR-326的表达，其对滋养细胞增殖、侵袭的抑制作用可以被PAX8的过表达逆转。 结论： 1.MiR-326能显著抑制滋养细胞的增殖及侵袭能力。 2.MiR-326通过靶向调节滋养细胞内PAX8抑制滋养细胞的增殖及侵袭能力。
NETL