摘要
目的：本研究主要观察miR-34a是否能够通过靶向FOXM1来抑制TGF-β1/Smad4信号通路的激活，从而对鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移产生影响，并从上皮间质转化方向研究侵袭和迁移的机制。 方法：荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常鼻咽上皮细胞NP69、鼻咽癌细胞HNE-1、CNE-2Z、5-8F中miR-34a与FOXM1的表达水平。以miR-34a表达低或FOXM1表达高的鼻咽癌细胞株作为后续实验鼻咽癌细胞株。上调miR-34a后，CCK-8法测细胞增殖能力，Transwell、划痕实验测细胞迁移、侵袭能力。生物信息软件预测miR-34a和FOXM1的靶向关系，qRT-PCR和Westernblot验证靶向关系。Westernblot法测FOXM1、TGF-β1、Smad4蛋白及上皮间质转化相关蛋白Snail、E-cadherin、Vimentin相对表达水平。下调FOXM1后，CCK-8法测细胞增殖能力，Westernblot法测TGF-β1、Smad4蛋白的相对表达水平。 结果：miR-34a在鼻咽癌细胞株中的表达低于正常鼻咽上皮细胞，FOXM1的表达则较高。在鼻咽癌细胞株中，CNE-2Z、HNE-1细胞中miR-34a的表达较低(P＜0.01)且FOXM1的表达较高(P＜0.01)。我们预测并验证了miR-34a和FOXM1可能存在靶向结合的位点，miR-34a可以负向调控FOXM1。当过表达miR-34a后，miR-34amimics组鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力被显著抑制(P＜0.01)，FOXM1、TGF-β1、Smad4、Snail、Vimentin的表达下调，E-cadherin表达上调(P＜0.01)。下调FOXM1后，si-FOXM1组鼻咽癌细胞的增殖被显著抑制(P＜0.01)，TGF-β1、Smad4的表达下调(P＜0.01)。 结论：miR-34a通过调控FOXM1/TGF-β/Smad4信号通路抑制了鼻咽癌细胞的增殖、侵袭与转移，其机理与抑制上皮细胞间质转移有关。
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