摘要
目的：探讨在缺血性脑卒中后通过社会隔离介导脑卒中后抑郁（post-strokedepression，PSD）之后，（R,S）-氯胺酮在神经再生和功能恢复中的作用及其潜在机制。此外，还研究了心房钠尿肽（atrialnatriureticpeptide，ANP）和PSD之间的内在相互作用，以及ANP在（R,S）-氯胺酮对中风后神经再生和功能恢复中的影响。 方法：1、左大脑中动脉栓塞（middlecerebralarteryocclusion，MCAO）模拟缺血性脑卒中,缺血60分钟后再灌注。成年雄性小鼠与卵巢切除雌性小鼠在清洁透明标准笼中配对饲养7天后接受MCAO或假手术（sham），在MCAO或假手术后3天开始将它们各自随机分成单独饲养组（housedisolately，ISO）或与原雌性小鼠一起饲养的配对饲养组（pair-housed，PH）。实验分为两部分。在第一部分中，术后14天（dayspost-ischemia，dpi）开始每天腹腔注射（R,S）-氯胺酮（15mg/kg）或生理盐水，连续14天。14dpi开始连续14天每天静脉内注射GLP-1R受体拮抗剂exendin9-39（50μg/kg）或等体积的生理盐水，在（R,S）-氯胺酮注射之前15分钟进行exendin9-39注射。在每组的三只随机小鼠中测量血糖，以确保血糖没有明显下降。在第二部分中，连续14天腹膜内注射钠尿肽受体A（natriureticpeptidereceptorsA，NPR-A）选择性拮抗剂A71915（0.5mg/kg）或生理盐水，A71915在（R,S）-氯胺酮注射前30分钟给予。 2、实验第一部分：（1）ELISA和Westernblotting检测：MCAO或假手术后28天收集血浆、心脏、脉络丛（choroidplexus，CP）和缺血大脑半球，分别检测ANP蛋白表达，并对心脏进行GLP-1R、GLP-1蛋白表达检测；（2）免疫荧光染色分析：检测心脏ANP表达，以及室管膜上皮细胞（theprimaryependymalepithelialcells，EEC）和脉络丛上皮细胞（choroidplexusepithelialcells，CPEC）中ANP表达；（3）抑郁样行为检测：MCAO或假手术后28天进行悬尾实验（tailsuspensiontest，TST）和强迫游泳实验（forcedswimtest，FST），29天进行蔗糖偏好实验（sucrosepreferencetest，SPT）。 3、实验第二部分：（1）MCAO后28天收集大脑，用免疫荧光法检测BrdU+/DCX+细胞以评估脑室下区（subventricularzone，SVZ）和缺血纹状体神经再生；（2）MCAO后3、4、6和10周用爬杆实验（poletest）、抬高的躯体摆动实验（elevatedbodyswingtest，EBST）和转轴实验（rotarodtest）来进行运动功能测定。 结果：MCAO与中风后社会隔离的结合成功建立了脑卒中后抑郁（PSD）模型，与PH小鼠相比，ISO小鼠的抑郁样行为更为突出。（R,S）-氯胺酮可改善脑卒中后ISO介导的PSD，并增加心房ANP表达以及心房和血浆中ANP水平。抑郁样行为与心房和血浆中的ANP水平呈显著负相关。（R,S）-氯胺酮通过改善ANP降低以促进ISO小鼠的神经再生和功能恢复。 结论：（R,S）-氯胺酮改善脑卒中后社会隔离介导的PSD，继而通过ANP促进神经再生和功能恢复。
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