CXCL13及CXCR5在下咽鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

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中文摘要：目的下咽部鳞状细胞癌虽然在头颈部肿瘤中罕见，发生率也相对的较低，但其恶性程度较高，注重生存率和保留器官功能(喉及咽的功能)并重的治疗方式是下咽鳞状细胞癌治疗的关注重点。在下咽鳞状细胞癌患者的治疗中，最值得进一步研究的是如何避免损伤喉功能的同时保证生存率，提高病人的生存质量。尽管对于下咽鳞状细胞癌患者的治疗方式在不断研究改进和发展，但目前为止下咽癌的生存率仍然难以得到明显提升。趋化因子CXCL13作为一种小分子蛋白多肽，与其免疫接受器的CXCR5受体联合协同作用，能直接促使血管新生、肿瘤细胞生长、存活分化和肿瘤扩散，可影响肿瘤细胞的早期产生、发展过程。本研究旨在探索下咽鳞癌中CXCL13及CXCR5的表达及临床意义，期望在将来有助于下咽鳞癌的治疗。方法搜集在青岛大学附属医院初次手术治疗，经病理确诊为下咽鳞状细胞癌的25例患者的手术后下咽癌病变组织及癌旁正常组织标本，使用实时荧光定量的PCR标记法及蛋白质印迹标记法来研究CXCL13和CXCR5基因在下咽部鳞状细胞癌中的体外表达水平和临床意义。1.实时荧光定量PCR标记法(RT-qPCR)：将来自25名患者的下咽癌组织和癌旁正常的组织样本进行检测。通过配对T检验，测定了CXCL13mRNA和CXCR5mRNA之间的表达差异，并通过单因素方差分析和独立样本T检验研究CXCL13mRNA和CXCR5mRNA与下咽鳞癌患者的关系。采用Pearson相关性分析CXCL13与CXCR5的相关性。2.蛋白质印迹法(WesternBlot，WB)：将25例下咽癌患者的下咽癌病灶组织标本和癌旁的正常组织标本采用WB技术做出的条带，用ImageJ测定灰度值，通过Mann-WhitneyU检验或Kruskal-Wallis检验来研究CXCL13蛋白和CXCR5蛋白与下咽部鳞状细胞癌之间的关系。使用Spearman秩相关分析CXCL13和CXCR5蛋白表达之间的相互关系。结果1.RT-qPCR结果：在下咽鳞癌组织中CXCL13mRNA及CXCR5mRNA的相对表达明显高于癌旁正常组织。CXCL13mRNA相对表达量t=-12.415、P=0.000，CXCR5mRNA的相对表达量t=-11.759、P=0.000。CXCL13及CXCR5mRNA相对表达量在临床分期(早中期、晚期)、是否淋巴结转移、病理分化程度表达有明显差异(P＜0.05)，但在年龄、原发灶部位无表达无差异(P＞0.05)。Pearson相关性分析显示，下咽鳞状细胞癌患者中CXCL13mRNA及CXCR5mRNA相对表达量r=0.853、P=0.000，呈显著正相关。2.WesternBlot结果：在下咽鳞状细胞癌组织中CXCL13蛋白及CXCR5蛋白的相对表达量均明显高于癌旁正常组织，检验结果分别为Z=-6.065、P=0.000，Z=-5.910、P=0.000。并且CXCL13及CXCR5蛋白的相对表达量结果与mRNA在各临床病理特征分组中具有一致性。Spearman相关分析示，下咽鳞状细胞癌患者中CXCL13及CXCR5蛋白相对表达量r=0.818、P=0.000，呈显著正相关。结论1.CXCL13及CXCR5的mRNA及蛋白水平在下咽鳞状细胞癌组织中均比癌旁正常组织表达显著升高，说明了CXCL13及CXCR5在下咽鳞癌中可能促进肿瘤进展。2.CXCL13及CXCR5mRNA及蛋白水平的表达在低分化、临床晚期及有淋巴结转移组中均呈现高表达,提示CXCL13及CXCR5的表达与下咽癌的发展、转移及恶性程度相关。3.CXCL13和CXCR5基因的mRNA水平及蛋白水平等都可在下咽癌细胞中得到高度的表达水平并与其呈较明显的正相关性。对二者的研究可明确靶向CXCL13/CXCR5通路的潜在益处，从而对下咽癌的治疗起一定的指导意义。

作者：

赵修凯

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关键词：

下咽鳞状细胞癌 CXCL13 CXCR5 临床病理

授予学位：

硕士

学科专业：

耳鼻咽喉科学

导师：

邱杰

学位年度：

2022

学位授予单位：

青岛大学

语种：

中文

中图分类号：

R73