摘要
目的: 本研究通四君子汤干预肺脾气虚COPD肌肉萎缩肠道菌群紊乱大鼠模型，探讨“肠道-肌肉轴”的真实性及中医“脾主四肢肌肉”理论的物质基础。在此基础上以中医理论为指导，将四君子汤运用于临床研究，观察探讨四君子汤对慢阻肺合并肌肉萎缩患者的临床疗效，为今后COPD肌肉萎缩病变患者的治疗、肺康复和提高患者活动耐量提供一定临床指导建议，并且有望为该病的诊断和治疗工作提供新的治疗思路。 方法: 实验部分:购进60只SD雄性大鼠，适应性喂养一周后，60只大鼠随机模型分组划分方式分为空白组和COPD模型组，以香烟烟熏联合入气管注入LPS的方法共同构造COPD模型。COPD模型组大鼠在成功的制备了COPD模型后，以糖皮质激素灌胃建立肺脾气虚肠道菌群紊乱模型，然后在肺脾气虚肠道菌群紊乱模型建立成功的基础上再应用悬吊法制作肌肉萎缩模型。鉴定肺脾气虚COPD肠道菌群紊乱肌肉萎缩大鼠模型建立成功后随机分为中药组及对照组，中药组予四君子汤连续灌胃4周，同期空白组及对照组予同等剂量无菌生理盐水灌胃，经予相应的干预及处理后，观察各组大鼠肺组织、骨骼肌纤维改变及肠道菌群改变情况。 临床部分:临床病例收集2019年7月至2020年12月贵州中医药大学第二附属医院呼吸内科因COPD急性发作住院后经通过中西医结合系统治疗后达到出院标准，稳定期慢阻肺合并肌肉萎缩功能障碍患者60例，均满足纳入标准，参考随机化临床分组的方法，将患者随机分为治疗组和对照组各30例。对照组予吸入沙美特罗替卡松粉吸入剂干预，治疗组在常规予吸入药物治疗基础上再加用四君子汤口服，每日三次，一次100ml，上诉治疗连续四周后，观察各组治疗前后的肺功能、6分钟步行距离、mMRC呼吸困难评分、视觉模拟呼吸困难评分(VAS)、Borg量表、中医症候积分改变。 结果: 实验部分:成功在烟熏联合气管内注入脂多糖的基础上以糖皮质激素灌胃建立肺脾气虚肠道菌群紊乱模型，再以悬吊法成功建立肺脾气虚COPD肠道菌群紊乱肌肉萎缩大鼠模型。造模成功大鼠表现精神萎靡，活动明显减少，予刺激后稍有活动反应，进食饮水均明显减少，大便稀溏，形体消瘦，毛发枯槁，出现缺血、缺氧表现。经予中药四君子汤干预后，中药组大鼠精神状态逐渐好转，活动逐渐增加，饮食增加，体重增加较明显，皮毛逐渐变得光泽，大便成形。肉眼观察大鼠肺组织可见COPD模型组大鼠肺组织外观颜色略苍白，呈充气、膨胀状态，支气管内充血，可见分泌物。肺组织HE染色COPD模型组呈现COPD典型的病理表现。对照组大鼠肺组织HE染色，可见肺泡壁结构破坏，肺泡壁断裂、融合，管壁增厚、官腔狭窄较COPD模型稍好转，但不明显，腔内少许分泌物阻塞，气管纤毛长短不一，排列不整齐，肺泡壁、支气管及血管内见炎性细胞浸润。中药组病理表象较对照组明显改善。股四头肌HE染色:骨骼肌萎缩模型大鼠股四头肌HE染色后见肌纤维间排列紊乱，纤维间隙明显增宽，纤维横截面积明显缩小，纤维间见少许炎症细胞浸润，呈明显肌肉萎缩病理表现，对照组见肌纤维病理改变较骨骼肌萎缩模型大鼠改变不明显。中药组肌纤维较对照组明显改善。ATP酶染色空白组大鼠肌纤维以Ⅰ型肌纤维为主。对照组大鼠中Ⅰ型肌纤维分布不均。中药组大鼠Ⅰ型肌纤维分布均匀，但各组间总体比较未见明显改变。 临床部分:两组纳入研究的患者肺功能(FEV1％pred、FEV1/FVC)比较，治疗组与对照组治疗前后组内进行比较，均有得到显著改善(P＜0.01)，四君子汤治疗组优于对照组。两组患者mMRC呼吸困难评分、视觉模拟呼吸困难评分(VAS)、Borg量表评分治疗组治与对照组治疗前后比较均存在显著差异(P＜0.01)，治疗组改善情况较对照组改善明显(P＜0.05)。6分钟步行距离两组患者在治疗前后组内比较也得到显著改善(P＜0.01)，治疗后两组进行组间比较，加用四君子汤治疗组治疗后患者六分钟步行距离改善情况优于对照组(P＜0.05)。两组患者中医症候积分组内比较，对照组与治疗组治疗前后中医症候积分总体评估比较均有显著差异（P＜0.01)，治疗组中医症状改善优于对照组。 结论: 中药四君子汤可通过调节大鼠肠道菌群中益生菌及致病菌的数量，进一步改善大鼠肌肉萎缩病变情况，在一定程度上为肠道-肌肉轴的存在提供了理论支撑，我们推测，肠道菌群可能参与了肌肉的合成和代谢过程。同时在临床研究中进一步发现四君子汤可使COPD伴肌肉萎缩患者的肌肉功能得到改善，增加其活动耐力，增强呼吸肌的力量，改善呼吸困难情况，能提高COPD患者的生活质量。结合前期动物实验，考虑调节肠道菌群可能是其作用机制之一。
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