摘要
生肌调节因子（MRFs）作为骨骼肌生成过程中重要的转录因子，对于骨骼肌细胞的分化与增殖起着关键的调节作用，MRFs家族编码Myf5、Myf6、MyoD和MyoG共4种转录因子，共同控制肌肉的形成和发育，对肉质风味也有着重要的影响。本研究为了获得梅花鹿生肌调节因子（MRFs）编码区序列（CDS），并探讨该基因在雌雄梅花鹿不同部位的肌组织间差异表达情况，选用成年健康雌雄梅花鹿心肌、背最长肌、股四头肌、臀大肌、肋间肌组织作为实验材料，以臀大肌组织 cDNA 为模板克隆得到 Myf5、Myf6、MyoD、MyoG基因CDS，进行测序及生物信息分析，并利用实时荧光定量PCR方法测定 Myf5、Myf6、MyoD、MyoG 基因在各肌组织中的 mRNA 相对表达量。得到以下结果： 1.克隆得到梅花鹿Myf5、Myf6、MyoD、MyoG基因 CDS，其长度分别为 768bp、729bp、685bp、684bp；经在 GenBank 比对分别与家牛（ Gene ID: 281335 ）、绵羊（ Gene ID: 100188930 ）、欧洲马鹿（ Gene ID: 122693872 ）、加拿大马鹿（ Gene ID:122452506）CDS 的同源性为 99.61%、99.17%、100%、100%；且分别与它们聚为同一支，遗传距离最近。Myf5、Myf6、MyoD、MyoG 均具有较强的亲水性；其蛋白氨基酸组成中含量最高的分别是丝氨酸、丝氨酸、丙氨酸、异亮氨酸，占氨基酸总数的 13.3%、10.7%、11.8%、11.0%；其蛋白二级结构均包含 α-螺旋、延伸链、无规则卷曲和、β-折叠。 2.梅花鹿 Myf5、Myf6、MyoD、MyoG 基因在雌、雄梅花鹿的各肌组织中均有表达。其中，Myf5 和 MyoG 基因在雌雄梅花鹿的臀大肌组织及雌性梅花鹿的肋间肌组织中的表达量显著高于其他组织（Plt;0.05）；Myf6 基因在雌雄梅花鹿的股四头肌组织中的表达量显著高于其他组织（Plt;0.05）；MyoG 基因在雌雄梅花鹿的臀大肌组织中的表达量显著高于其他组织（Plt;0.05）。此外，除心肌和肋间肌外的各肌肉组织的 Myf5、Myf6、MyoD、MyoG 基因的表达量在雌雄梅花鹿中均表现出大体一致的趋势，雌雄之间无显著差异（Pgt;0.05）。 综上所述，Myf5、Myf6、MyoD、MyoG 基因在雌、雄性梅花鹿的臀大肌、背最长肌、股四头肌、心肌、肋间肌组织中均发挥生肌调控作用，并且性别对心肌、肋间肌组织中生肌因子的作用有显著影响（Plt;0.05），而对臀大肌组织、背最长肌组织、股四头肌组织中生肌因子的作用均无显著影响（Pgt;0.05）。掌握生肌调节因子（MRFs）在不同肌肉组织中的差异性表达规律为提高鹿肉的生产性能及养殖鹿业的经济效益提供数据依据，对国内养殖鹿业有一定的意义。
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