摘要
研究背景:非酒精性脂肪性肝炎(NASH)是代谢功能障碍相关脂肪肝病(MAFLD)的炎症亚型，其患者人群表现为肥胖型和非肥胖/瘦型两种特征。中等强度运动是改善非酒精性脂肪肝(NAFL)的有效方式，但其对NASH(特别是炎症)的作用尚未明确。本研究拟解决两个问题:其一，构建肥胖型和瘦型NASH小鼠模型，比较其特征差异;其二，明确中等强度运动对NASH的作用，探讨炎症涉及的细胞和信号通路。 研究方法:实验分为NASH造模和中等强度运动训练两部分。野生型C57小鼠分别采用高脂高胆固醇饮食和动脉粥样硬化饮食，并以饮水的方式摄入高果糖。造模12周、24周和32周，以此构建肥胖型NASH和瘦型NASH模型。在小鼠造模12周时开始进行中等强度的运动训练，持续12周至20周。从体重、体成分、糖脂代谢、基础代谢水平和NASH肝脏病变多个方面观察两种模型的特征，以及运动对它们的作用。NASH的肝脏病变用病理染色、NAS评分、脂质蓄积定量和相关基因的转录水平进行评估。最终，对小鼠的肝组织进行转录组学分析。 结果:两种模型各有异同。在肝脏病变方面，肥胖型和瘦型NASH小鼠模型均表现出脂肪变性、肝小叶炎症、肝细胞气球样变和纤维化。瘦型NASH小鼠表现出微囊型脂肪变性和更严重的炎症细胞募集。在代谢紊乱方面，肥胖NASH小鼠出现肥胖、血脂紊乱和糖代谢异常的表型，具有代谢综合征的特征。瘦型NASH小鼠则表现出明显的脂代谢紊乱。 中等强度运动12周后，肥胖NASH小鼠得到明显改善。在NASH病变方面，脂肪变性、肝小叶炎症、肝细胞气球样变和纤维化明显减少，NAS评分＜5。在代谢方面，小鼠体重减轻，皮下脂肪组织减少。肝内和血清的脂质代谢紊乱明显改善。空腹血糖的异常和胰岛素抵抗在运动训练前期得到缓解，基础代谢水平出现降低。在基因的转录方面，脂代谢相关基因(CD36、SREBP1C和PPARγ)被下调，CPT1被上调。炎症相关基因(TNFa、CCL2、CCL5、CCR2)和纤维化相关基因(Col1a1、Col1a2、Col3a1、TIMP1)均被显著下调。经转录组分析显示，包括趋化因子、Toll样受体和C型凝集素受体在内的多条炎症信号通路，以及NK细胞介导的细胞毒性作用和中性粒细胞胞外陷阱(NETs)形成的信号通路均在运动后被显著下调。 结论:肥胖型NASH小鼠模型较好地模拟了肥胖人群在代谢综合征背景下发生的NASH。瘦型NASH小鼠具有应用于微囊型脂肪变研究的意义。中等强度运动改善NASH的机制可能是下调了趋化因子、Toll样受体和C型凝集素受体在内的多条炎症信号通路，以及抑制NK细胞介导的细胞毒性作用和中性粒细胞胞外陷阱(NETs)形成。此假设需进一步的实验进行验证。
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